分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2013年
11期
1659-1663
,共5页
刘利娟%陈怡%王伟%陈超%高明昊%张晓青%张娟琨
劉利娟%陳怡%王偉%陳超%高明昊%張曉青%張娟琨
류리연%진이%왕위%진초%고명호%장효청%장연곤
肺表面活性蛋白A%指数式富集的配基系统进化%寡核苷酸适配子
肺錶麵活性蛋白A%指數式富集的配基繫統進化%寡覈苷痠適配子
폐표면활성단백A%지수식부집적배기계통진화%과핵감산괄배자
Pulmonary surfactant protein A%Systematic evolution of ligands by exponential enrichment%Aptamer
利用指数式富集的配基系统进化(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术筛选肺表面活性蛋白A(Pulmonary Surfactant Protein A,SP-A)的寡核苷酸适配体.通过对循环次数、退火温度及引物比例的优化,建立了适合的筛选体系;筛选产物经克隆测序后,用DNAMAN软件初步分析其结构.最终确定以12个循环,55℃为退火温度及80∶1为引物比的反应条件;经过9轮循环筛选,随机ssDNA库与SP-A的结合率从1.3％上升到33％;AP-3和AP-2适配体的随机区含有保守序列TAC-GT,AP-3和AP-1适配体的随机区含有保守序列ACAG,且各适配体的二级结构均以茎-环结构为主.
利用指數式富集的配基繫統進化(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技術篩選肺錶麵活性蛋白A(Pulmonary Surfactant Protein A,SP-A)的寡覈苷痠適配體.通過對循環次數、退火溫度及引物比例的優化,建立瞭適閤的篩選體繫;篩選產物經剋隆測序後,用DNAMAN軟件初步分析其結構.最終確定以12箇循環,55℃為退火溫度及80∶1為引物比的反應條件;經過9輪循環篩選,隨機ssDNA庫與SP-A的結閤率從1.3％上升到33％;AP-3和AP-2適配體的隨機區含有保守序列TAC-GT,AP-3和AP-1適配體的隨機區含有保守序列ACAG,且各適配體的二級結構均以莖-環結構為主.
이용지수식부집적배기계통진화(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)기술사선폐표면활성단백A(Pulmonary Surfactant Protein A,SP-A)적과핵감산괄배체.통과대순배차수、퇴화온도급인물비례적우화,건립료괄합적사선체계;사선산물경극륭측서후,용DNAMAN연건초보분석기결구.최종학정이12개순배,55℃위퇴화온도급80∶1위인물비적반응조건;경과9륜순배사선,수궤ssDNA고여SP-A적결합솔종1.3％상승도33％;AP-3화AP-2괄배체적수궤구함유보수서렬TAC-GT,AP-3화AP-1괄배체적수궤구함유보수서렬ACAG,차각괄배체적이급결구균이경-배결구위주.
