中华实用儿科临床杂志
中華實用兒科臨床雜誌
중화실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2013年
19期
1474-1477
,共4页
李梦妮%付燕红%龚小霞%李运壁%母发光%廖静%朱小石
李夢妮%付燕紅%龔小霞%李運壁%母髮光%廖靜%硃小石
리몽니%부연홍%공소하%리운벽%모발광%료정%주소석
鹅膏毒肽%人肝细胞%胆酸%损伤
鵝膏毒肽%人肝細胞%膽痠%損傷
아고독태%인간세포%담산%손상
Amataxins%Human live cell line%Cholic acid%Damage
目的 探讨不同胆酸减轻受鹅膏毒肽攻击人肝细胞(L-O2)损伤的作用及机制.方法 根据鹅膏毒肽的质量浓度将实验分为0.00 g/L、0.26 g/L、0.40 g/L、1.40 g/L、2.80 g/L共5个剂量组,将培养至指数生长期的L-O2铺于96孔板,每孔1×103细胞,24 h加入上述浓度的鹅膏毒肽,每组设3个复孔,分别与药物作用24、48、72 h采用四唑盐(MTT)比色法检测肝细胞活性,确定肝细胞生存的最小鹅膏菌毒素攻击剂量.实验分为空白对照组、损伤组和胆酸组,每个组均设3个时间点:攻击24、48、72 h,在攻击24h后使用牛磺胆酸、鹅脱氧胆酸、甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸和牛磺鹅脱氧胆酸分别保护损伤肝细胞,在倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变,MTT法进行活细胞计数,生化法检测培养上清液中AST和ALT.结果 肝细胞生存的鹅膏毒肽体外最小攻击剂量为1.40 g/L.空白对照组、损伤组、牛磺胆酸组、鹅脱氧胆酸组、甘氨胆酸组、甘氨鹅脱氧胆酸组及牛磺鹅脱氧胆酸组在鹅膏毒肽攻击肝细胞72 h时吸光度分别为0.812 ±0.035、0.345 ±0.021、0.363±0.018、0.387±0.027、0.431 ±0.018、0.465 ±0.015及0.452±0.030.胆酸各组较损伤组攻击72 h时吸光度逐渐升高,其中鹅脱氧胆酸组、甘氨胆酸组、甘氨鹅脱氧胆酸组、牛磺鹅脱氧胆酸组与损伤组比较差异有统计学意义(P＜0.05).胆酸各组AST和ALT活性下降,其中甘氨鹅脱氧胆酸组AST和ALT活性最低,与损伤组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 胆酸对鹅膏毒肽攻击L-O2有保护作用,作用机制可能与鹅膏毒肽和胆酸同为钠离子-牛磺酸共同转运多肽和有机阴离子转运多肽底物有关.
目的 探討不同膽痠減輕受鵝膏毒肽攻擊人肝細胞(L-O2)損傷的作用及機製.方法 根據鵝膏毒肽的質量濃度將實驗分為0.00 g/L、0.26 g/L、0.40 g/L、1.40 g/L、2.80 g/L共5箇劑量組,將培養至指數生長期的L-O2鋪于96孔闆,每孔1×103細胞,24 h加入上述濃度的鵝膏毒肽,每組設3箇複孔,分彆與藥物作用24、48、72 h採用四唑鹽(MTT)比色法檢測肝細胞活性,確定肝細胞生存的最小鵝膏菌毒素攻擊劑量.實驗分為空白對照組、損傷組和膽痠組,每箇組均設3箇時間點:攻擊24、48、72 h,在攻擊24h後使用牛磺膽痠、鵝脫氧膽痠、甘氨膽痠、甘氨鵝脫氧膽痠和牛磺鵝脫氧膽痠分彆保護損傷肝細胞,在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態學改變,MTT法進行活細胞計數,生化法檢測培養上清液中AST和ALT.結果 肝細胞生存的鵝膏毒肽體外最小攻擊劑量為1.40 g/L.空白對照組、損傷組、牛磺膽痠組、鵝脫氧膽痠組、甘氨膽痠組、甘氨鵝脫氧膽痠組及牛磺鵝脫氧膽痠組在鵝膏毒肽攻擊肝細胞72 h時吸光度分彆為0.812 ±0.035、0.345 ±0.021、0.363±0.018、0.387±0.027、0.431 ±0.018、0.465 ±0.015及0.452±0.030.膽痠各組較損傷組攻擊72 h時吸光度逐漸升高,其中鵝脫氧膽痠組、甘氨膽痠組、甘氨鵝脫氧膽痠組、牛磺鵝脫氧膽痠組與損傷組比較差異有統計學意義(P＜0.05).膽痠各組AST和ALT活性下降,其中甘氨鵝脫氧膽痠組AST和ALT活性最低,與損傷組比較差異有統計學意義(P＜0.01).結論 膽痠對鵝膏毒肽攻擊L-O2有保護作用,作用機製可能與鵝膏毒肽和膽痠同為鈉離子-牛磺痠共同轉運多肽和有機陰離子轉運多肽底物有關.
목적 탐토불동담산감경수아고독태공격인간세포(L-O2)손상적작용급궤제.방법 근거아고독태적질량농도장실험분위0.00 g/L、0.26 g/L、0.40 g/L、1.40 g/L、2.80 g/L공5개제량조,장배양지지수생장기적L-O2포우96공판,매공1×103세포,24 h가입상술농도적아고독태,매조설3개복공,분별여약물작용24、48、72 h채용사서염(MTT)비색법검측간세포활성,학정간세포생존적최소아고균독소공격제량.실험분위공백대조조、손상조화담산조,매개조균설3개시간점:공격24、48、72 h,재공격24h후사용우광담산、아탈양담산、감안담산、감안아탈양담산화우광아탈양담산분별보호손상간세포,재도치상차현미경하관찰세포형태학개변,MTT법진행활세포계수,생화법검측배양상청액중AST화ALT.결과 간세포생존적아고독태체외최소공격제량위1.40 g/L.공백대조조、손상조、우광담산조、아탈양담산조、감안담산조、감안아탈양담산조급우광아탈양담산조재아고독태공격간세포72 h시흡광도분별위0.812 ±0.035、0.345 ±0.021、0.363±0.018、0.387±0.027、0.431 ±0.018、0.465 ±0.015급0.452±0.030.담산각조교손상조공격72 h시흡광도축점승고,기중아탈양담산조、감안담산조、감안아탈양담산조、우광아탈양담산조여손상조비교차이유통계학의의(P＜0.05).담산각조AST화ALT활성하강,기중감안아탈양담산조AST화ALT활성최저,여손상조비교차이유통계학의의(P＜0.01).결론 담산대아고독태공격L-O2유보호작용,작용궤제가능여아고독태화담산동위납리자-우광산공동전운다태화유궤음리자전운다태저물유관.
