中华实用儿科临床杂志
中華實用兒科臨床雜誌
중화실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2013年
19期
1455-1458
,共4页
史春梅%季晨博%王玉美%陈玲%杨蕾%徐广峰%郭锡熔
史春梅%季晨博%王玉美%陳玲%楊蕾%徐廣峰%郭錫鎔
사춘매%계신박%왕옥미%진령%양뢰%서엄봉%곽석용
肥胖%羰基-氰-对-三氟甲氧基本腙%脂肪细胞%线粒体功能%胰岛素敏感性
肥胖%羰基-氰-對-三氟甲氧基本腙%脂肪細胞%線粒體功能%胰島素敏感性
비반%탄기-청-대-삼불갑양기본종%지방세포%선립체공능%이도소민감성
Obesity%Cyanide p-trifluoromethoxyphenyl-hydrazone%Adipocytes%Mitochondria function%Insulin sensitivity
目的 观察线粒体氧化磷酸化解耦联剂——羰基-氰-对-三氟甲氧基本腙(FCCP)对成熟脂肪细胞胰岛素敏感性及线粒体功能的影响.方法 以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,诱导分化为成熟脂肪细胞,给予7.5 μmol/L FCCP干预分化成熟的3T3-L1脂肪细胞12 h后,采用3H标记的2-脱氧葡萄糖检测成熟脂肪细胞基础状态下及胰岛素刺激下葡萄糖摄取率；采用Western blot检测葡萄糖转运体4(GLUT4)的表达及转位,同时检测胰岛素信号转导通路中相关信号分子胰岛素受体底物-1(IRS-1)、Akt的总蛋白水平及磷酸化水平；采用透视电镜观察线粒体形态改变；荧光定量PCR技术检测线粒体DNA拷贝数；生物发光法检测细胞ATP水平；应用流式细胞仪观察线粒体膜电位及细胞活性氧簇(ROS)的变化.结果 (1)FCCP干预成熟脂肪细胞后降低了胰岛素刺激下的葡萄糖摄取率(t=5.87,P＜0.01),但基础葡萄糖摄取变化率比较差异无统计学意义(t=-0.07,P＞0.05)；(2)FCCP干预抑制成熟脂肪细胞胰岛素刺激下的IRS-1、Akt磷酸化活性,减少GLUT4由胞质向胞膜的转位；(3)FCCP干预成熟脂肪细胞后,线粒体出现嵴断裂、减少、消失,部分线粒体肿胀,甚至呈空泡状等形态学变化；(4)FCCP显著下调成熟脂肪细胞中线粒体DNA拷贝数(t=-1.73,P＜0.001)；(5)FCCP显著下调成熟脂肪细胞中ATP水平和线粒体膜电位(t=6.08、4.83,P＜0.0001、0.01),但增加成熟脂肪细胞中ROS水平(t=-6.82,P＜0.01).结论 FCCP导致脂肪细胞线粒体形态异常、功能损伤及胰岛素敏感性降低,提示FCCP损害成熟脂肪细胞的胰岛素敏感性可能与FCCP引起的ROS水平增高有关.
目的 觀察線粒體氧化燐痠化解耦聯劑——羰基-氰-對-三氟甲氧基本腙(FCCP)對成熟脂肪細胞胰島素敏感性及線粒體功能的影響.方法 以3T3-L1前體脂肪細胞為研究對象,誘導分化為成熟脂肪細胞,給予7.5 μmol/L FCCP榦預分化成熟的3T3-L1脂肪細胞12 h後,採用3H標記的2-脫氧葡萄糖檢測成熟脂肪細胞基礎狀態下及胰島素刺激下葡萄糖攝取率；採用Western blot檢測葡萄糖轉運體4(GLUT4)的錶達及轉位,同時檢測胰島素信號轉導通路中相關信號分子胰島素受體底物-1(IRS-1)、Akt的總蛋白水平及燐痠化水平；採用透視電鏡觀察線粒體形態改變；熒光定量PCR技術檢測線粒體DNA拷貝數；生物髮光法檢測細胞ATP水平；應用流式細胞儀觀察線粒體膜電位及細胞活性氧簇(ROS)的變化.結果 (1)FCCP榦預成熟脂肪細胞後降低瞭胰島素刺激下的葡萄糖攝取率(t=5.87,P＜0.01),但基礎葡萄糖攝取變化率比較差異無統計學意義(t=-0.07,P＞0.05)；(2)FCCP榦預抑製成熟脂肪細胞胰島素刺激下的IRS-1、Akt燐痠化活性,減少GLUT4由胞質嚮胞膜的轉位；(3)FCCP榦預成熟脂肪細胞後,線粒體齣現嵴斷裂、減少、消失,部分線粒體腫脹,甚至呈空泡狀等形態學變化；(4)FCCP顯著下調成熟脂肪細胞中線粒體DNA拷貝數(t=-1.73,P＜0.001)；(5)FCCP顯著下調成熟脂肪細胞中ATP水平和線粒體膜電位(t=6.08、4.83,P＜0.0001、0.01),但增加成熟脂肪細胞中ROS水平(t=-6.82,P＜0.01).結論 FCCP導緻脂肪細胞線粒體形態異常、功能損傷及胰島素敏感性降低,提示FCCP損害成熟脂肪細胞的胰島素敏感性可能與FCCP引起的ROS水平增高有關.
목적 관찰선립체양화린산화해우련제——탄기-청-대-삼불갑양기본종(FCCP)대성숙지방세포이도소민감성급선립체공능적영향.방법 이3T3-L1전체지방세포위연구대상,유도분화위성숙지방세포,급여7.5 μmol/L FCCP간예분화성숙적3T3-L1지방세포12 h후,채용3H표기적2-탈양포도당검측성숙지방세포기출상태하급이도소자격하포도당섭취솔；채용Western blot검측포도당전운체4(GLUT4)적표체급전위,동시검측이도소신호전도통로중상관신호분자이도소수체저물-1(IRS-1)、Akt적총단백수평급린산화수평；채용투시전경관찰선립체형태개변；형광정량PCR기술검측선립체DNA고패수；생물발광법검측세포ATP수평；응용류식세포의관찰선립체막전위급세포활성양족(ROS)적변화.결과 (1)FCCP간예성숙지방세포후강저료이도소자격하적포도당섭취솔(t=5.87,P＜0.01),단기출포도당섭취변화솔비교차이무통계학의의(t=-0.07,P＞0.05)；(2)FCCP간예억제성숙지방세포이도소자격하적IRS-1、Akt린산화활성,감소GLUT4유포질향포막적전위；(3)FCCP간예성숙지방세포후,선립체출현척단렬、감소、소실,부분선립체종창,심지정공포상등형태학변화；(4)FCCP현저하조성숙지방세포중선립체DNA고패수(t=-1.73,P＜0.001)；(5)FCCP현저하조성숙지방세포중ATP수평화선립체막전위(t=6.08、4.83,P＜0.0001、0.01),단증가성숙지방세포중ROS수평(t=-6.82,P＜0.01).결론 FCCP도치지방세포선립체형태이상、공능손상급이도소민감성강저,제시FCCP손해성숙지방세포적이도소민감성가능여FCCP인기적ROS수평증고유관.
