食品与生物技术学报
食品與生物技術學報
식품여생물기술학보
JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY
2013年
2期
124-128
,共5页
张慧敏%李剑芳%邬敏辰%魏喜换%杨严俊
張慧敏%李劍芳%鄔敏辰%魏喜換%楊嚴俊
장혜민%리검방%오민신%위희환%양엄준
耐热木聚糖酶%毕赤酵母%异源表达%酶学性质
耐熱木聚糖酶%畢赤酵母%異源錶達%酶學性質
내열목취당매%필적효모%이원표체%매학성질
将一种11家族极端耐热木聚糖酶的密码子优化基因Syxyn11克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,得到重组质粒pPIC9K-Syxyn11,将其经Sal Ⅰ线性化后转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115.经G418筛选得到重组工程菌GS115/Syxyn11,用甲醇诱导表达重组木聚糖酶SyXyn11,酶活可达到17.74 U/mL.SDS-PAGE显示,SyXyn11的相对分子质量为31 000.SyXyn11的最适反应温度为85℃,在80℃以下稳定.最适反应pH为6.5,在pH 5.0～7.5范围内稳定.EDTA和大多数金属离子对重组酶的活性影响不大.结果表明Syxyn11成功在P.pastoris GS115中实现表达,而且重组木聚糖酶的耐热性并未改变.
將一種11傢族極耑耐熱木聚糖酶的密碼子優化基因Syxyn11剋隆到畢赤酵母錶達載體pPIC9K中,得到重組質粒pPIC9K-Syxyn11,將其經Sal Ⅰ線性化後轉化畢赤酵母(Pichia pastoris)GS115.經G418篩選得到重組工程菌GS115/Syxyn11,用甲醇誘導錶達重組木聚糖酶SyXyn11,酶活可達到17.74 U/mL.SDS-PAGE顯示,SyXyn11的相對分子質量為31 000.SyXyn11的最適反應溫度為85℃,在80℃以下穩定.最適反應pH為6.5,在pH 5.0～7.5範圍內穩定.EDTA和大多數金屬離子對重組酶的活性影響不大.結果錶明Syxyn11成功在P.pastoris GS115中實現錶達,而且重組木聚糖酶的耐熱性併未改變.
장일충11가족겁단내열목취당매적밀마자우화기인Syxyn11극륭도필적효모표체재체pPIC9K중,득도중조질립pPIC9K-Syxyn11,장기경Sal Ⅰ선성화후전화필적효모(Pichia pastoris)GS115.경G418사선득도중조공정균GS115/Syxyn11,용갑순유도표체중조목취당매SyXyn11,매활가체도17.74 U/mL.SDS-PAGE현시,SyXyn11적상대분자질량위31 000.SyXyn11적최괄반응온도위85℃,재80℃이하은정.최괄반응pH위6.5,재pH 5.0～7.5범위내은정.EDTA화대다수금속리자대중조매적활성영향불대.결과표명Syxyn11성공재P.pastoris GS115중실현표체,이차중조목취당매적내열성병미개변.
