家畜生态学报
傢畜生態學報
가축생태학보
ACTA ECOLOGAE ANIMALIS DOMASTICI
2013年
2期
15-18
,共4页
马倩倩%宋玲玲%王红梅%方永志%王立群%何洪彬
馬倩倩%宋玲玲%王紅梅%方永誌%王立群%何洪彬
마천천%송령령%왕홍매%방영지%왕립군%하홍빈
人血小板生成素%基因克隆%CHO稳定细胞系%Western blot
人血小闆生成素%基因剋隆%CHO穩定細胞繫%Western blot
인혈소판생성소%기인극륭%CHO은정세포계%Western blot
以人肝cDNA为模板克隆了人血小板生成素(Human Thrombopoietin,hTPO)基因,利用基因重组技术构建了带有新霉素抗性基因(neo)筛选标记的pcDNA3.1(+)-hTPO真核表达载体,将重组质粒瞬时转染293T细胞,用鼠抗人TPO单抗Western blot检测TPO蛋白的瞬时表达；再将重组质粒转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO),应用400 μg/mL的G418筛选克隆,经PCR及Western blot验证,获得了3株hTPO蛋白表达水平不同的CHO细胞系,为获得大量蛋白并进行活性功能试验及临床应用奠定基础.
以人肝cDNA為模闆剋隆瞭人血小闆生成素(Human Thrombopoietin,hTPO)基因,利用基因重組技術構建瞭帶有新黴素抗性基因(neo)篩選標記的pcDNA3.1(+)-hTPO真覈錶達載體,將重組質粒瞬時轉染293T細胞,用鼠抗人TPO單抗Western blot檢測TPO蛋白的瞬時錶達；再將重組質粒轉染中國倉鼠卵巢細胞(Chinese Hamster Ovary,CHO),應用400 μg/mL的G418篩選剋隆,經PCR及Western blot驗證,穫得瞭3株hTPO蛋白錶達水平不同的CHO細胞繫,為穫得大量蛋白併進行活性功能試驗及臨床應用奠定基礎.
이인간cDNA위모판극륭료인혈소판생성소(Human Thrombopoietin,hTPO)기인,이용기인중조기술구건료대유신매소항성기인(neo)사선표기적pcDNA3.1(+)-hTPO진핵표체재체,장중조질립순시전염293T세포,용서항인TPO단항Western blot검측TPO단백적순시표체；재장중조질립전염중국창서란소세포(Chinese Hamster Ovary,CHO),응용400 μg/mL적G418사선극륭,경PCR급Western blot험증,획득료3주hTPO단백표체수평불동적CHO세포계,위획득대량단백병진행활성공능시험급림상응용전정기출.
