CAJ | 학술논문

通过对已构建新吉细毛羊皮肤组织的均一化全长cDNA文库进行活化,在此基础上进行EST生物信息学分析研究,期望能发现影响细毛羊羊毛性状的主效基因或相关基因.运用菌落PCR、菌液PCR、质粒快速鉴定3种方法对cDNA文库进行评价,通过测序,在NCBI上BLASTn搜索、比对及运用DNAstar等软件进行分析.初步鉴定的结果:cDNA文库的库容量(滴度)为1.57×106 pfu/mL,菌落PCR、菌液PCR阳性克隆的小片段率在80％～90％,克隆的片段大小在0.6～2.0 kb,cDNA在300～500 bp,而质粒快速鉴定的在90％,克隆的片段载体带大小3.5～5.0 kb.质粒快速鉴定的效果好于其他两种方法,耗时相对短,同时小片段率高；cDNA文库保存完好,符合基因文库的质量要求,有足够大的库容量来保证筛选目的基因.通过对筛选的阳性克隆5’端随机测序,随后获得可读序列169条,经过相关生物信息查询之后,发现其中可能含有完整基因.
통과대이구건신길세모양피부조직적균일화전장cDNA문고진행활화,재차기출상진행EST생물신식학분석연구,기망능발현영향세모양양모성상적주효기인혹상관기인.운용균락PCR、균액PCR、질립쾌속감정3충방법대cDNA문고진행평개,통과측서,재NCBI상BLASTn수색、비대급운용DNAstar등연건진행분석.초보감정적결과:cDNA문고적고용량(적도)위1.57×106 pfu/mL,균락PCR、균액PCR양성극륭적소편단솔재80％～90％,극륭적편단대소재0.6～2.0 kb,cDNA재300～500 bp,이질립쾌속감정적재90％,극륭적편단재체대대소3.5～5.0 kb.질립쾌속감정적효과호우기타량충방법,모시상대단,동시소편단솔고；cDNA문고보존완호,부합기인문고적질량요구,유족구대적고용량래보증사선목적기인.통과대사선적양성극륭5’단수궤측서,수후획득가독서렬169조,경과상관생물신식사순지후,발현기중가능함유완정기인.