新疆农业大学学报
新疆農業大學學報
신강농업대학학보
JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
4期
265-268
,共4页
孟灵真%陈全家%杨婷%阿依夏木·古丽%王希东%曲延英
孟靈真%陳全傢%楊婷%阿依夏木·古麗%王希東%麯延英
맹령진%진전가%양정%아의하목·고려%왕희동%곡연영
抗除草剂%抗虫%双价植物表达载体%棉花%PPT头孢霉素
抗除草劑%抗蟲%雙價植物錶達載體%棉花%PPT頭孢黴素
항제초제%항충%쌍개식물표체재체%면화%PPT두포매소
herbicide-resistant%against insects%binary expression vector%cefotaxime
根据GenBank上发表的抗除草剂bar基因序列设计引物,通过高保真DNA聚合酶进行PCR扩增,获得bar基因片段,连接在pMD18-T中间克隆载体上,用限制性内切酶XbaI和BamH I酶切后连接到pBI121上获得pBI121-bar.用HindⅢ内切酶切含Bt-4AB基因的质粒并与pBI121-bar重组,重组质粒命名为pBI 121-bar/Bt.重组质粒导人农杆菌LBA4404工程菌中,转化新海24号棉花胚性愈伤组织.PPT抗性实验证明,构建的pBI121-bar/Bt载体获得抗除草剂抗性,并筛选出PPT临界筛选浓度为3.0 mg/L.
根據GenBank上髮錶的抗除草劑bar基因序列設計引物,通過高保真DNA聚閤酶進行PCR擴增,穫得bar基因片段,連接在pMD18-T中間剋隆載體上,用限製性內切酶XbaI和BamH I酶切後連接到pBI121上穫得pBI121-bar.用HindⅢ內切酶切含Bt-4AB基因的質粒併與pBI121-bar重組,重組質粒命名為pBI 121-bar/Bt.重組質粒導人農桿菌LBA4404工程菌中,轉化新海24號棉花胚性愈傷組織.PPT抗性實驗證明,構建的pBI121-bar/Bt載體穫得抗除草劑抗性,併篩選齣PPT臨界篩選濃度為3.0 mg/L.
근거GenBank상발표적항제초제bar기인서렬설계인물,통과고보진DNA취합매진행PCR확증,획득bar기인편단,련접재pMD18-T중간극륭재체상,용한제성내절매XbaI화BamH I매절후련접도pBI121상획득pBI121-bar.용HindⅢ내절매절함Bt-4AB기인적질립병여pBI121-bar중조,중조질립명명위pBI 121-bar/Bt.중조질립도인농간균LBA4404공정균중,전화신해24호면화배성유상조직.PPT항성실험증명,구건적pBI121-bar/Bt재체획득항제초제항성,병사선출PPT림계사선농도위3.0 mg/L.
