CAJ | 학술논문

蛋白质的还原-烷基化是蛋白质酶切中的重要步骤,常用的烷基化试剂是碘乙酰胺(IAA),但是IAA除了和半胱氨酸发生反应,也可能和其他多种氨基酸发生副反应.我们模拟常规的酶切条件,系统地研究了蛋白质真实酶切时所有酶切肽段发生烷基化的情况.结果表明,多种氨基酸可以发生烷基化,其趋势为:半胱氨酸＞肽段N端氨基酸＞天冬氨酸＞谷氨酸＞组氨酸＞天冬酰胺＞赖氨酸＞酪氨酸,同时也发现同一肽段上的氨基酸烷基化具有排他性和聚集性.根据定性结果,采用质谱多反应监测(MRM)技术对多个肽段进行了定量分析,评估了过烷基化对蛋白质定量分析的影响.该研究结果表明,过量的烷基化修饰对蛋白质的定性与定量分析都可能产生较大影响.在蛋白质组学研究的样本处理流程中,应避免样本的过烷基化.
단백질적환원-완기화시단백질매절중적중요보취,상용적완기화시제시전을선알(IAA),단시IAA제료화반광안산발생반응,야가능화기타다충안기산발생부반응.아문모의상규적매절조건,계통지연구료단백질진실매절시소유매절태단발생완기화적정황.결과표명,다충안기산가이발생완기화,기추세위:반광안산＞태단N단안기산＞천동안산＞곡안산＞조안산＞천동선알＞뢰안산＞락안산,동시야발현동일태단상적안기산완기화구유배타성화취집성.근거정성결과,채용질보다반응감측(MRM)기술대다개태단진행료정량분석,평고료과완기화대단백질정량분석적영향.해연구결과표명,과량적완기화수식대단백질적정성여정량분석도가능산생교대영향.재단백질조학연구적양본처리류정중,응피면양본적과완기화.