中国油料作物学报
中國油料作物學報
중국유료작물학보
CHINESE JOURNAL OF OIL CROP SCIENCES
2013年
5期
484-490
,共7页
严明理%刘丽莉%向建华%丁素萍%舒佳宾%孙婵
嚴明理%劉麗莉%嚮建華%丁素萍%舒佳賓%孫嬋
엄명리%류려리%향건화%정소평%서가빈%손선
黑芥%ANS%克隆%B基因组%PCR鉴别
黑芥%ANS%剋隆%B基因組%PCR鑒彆
흑개%ANS%극륭%B기인조%PCR감별
Brassica nigra%ANS%Cloning%Genome B%PCR identification
利用同源克隆方法克隆黑芥ANS基因,获得2个ANS基因拷贝BnANS1和BnANS2,长度分别为1 366bp和1 367bp.这2个基因都有1个76bp的内含子.比较BnAⅣS1和BnANS2基因序列,发现在编码区、5'与3'非编码区和内含子区域都有多态性,5'非编码区有3个碱基的多态性和4个碱基的缺失,编码区有26个碱基的多态性;内含子有2个碱基的多态性;3'非编码区有18个碱基的多态性和3个碱基的插入.这2个ANS拷贝都编码356个氨基酸的蛋白,具有其他物种同样的ANS蛋白保守结构域,属于2OG-Fe(Ⅱ)加氧酶超家族.BnANS1编码的蛋白质理论分子量为40 448.58Da,等电点为5.05;BnANS2编码的蛋白质理论分子量为40 468.52Da,等电点为5.04.比较这2个ANS基因拷贝编码的蛋白质序列,发现有9个多态性位点.这2个ANS拷贝在黑芥的种皮和胚中均检测到表达.获得了1对ANS引物,能从白菜、黑芥、甘蓝、芥菜型油菜、甘蓝型油菜和埃塞俄比亚芥中,用等位特异PCR方法特异识别来自芸薹属B基因组的ANS基因.
利用同源剋隆方法剋隆黑芥ANS基因,穫得2箇ANS基因拷貝BnANS1和BnANS2,長度分彆為1 366bp和1 367bp.這2箇基因都有1箇76bp的內含子.比較BnAⅣS1和BnANS2基因序列,髮現在編碼區、5'與3'非編碼區和內含子區域都有多態性,5'非編碼區有3箇堿基的多態性和4箇堿基的缺失,編碼區有26箇堿基的多態性;內含子有2箇堿基的多態性;3'非編碼區有18箇堿基的多態性和3箇堿基的插入.這2箇ANS拷貝都編碼356箇氨基痠的蛋白,具有其他物種同樣的ANS蛋白保守結構域,屬于2OG-Fe(Ⅱ)加氧酶超傢族.BnANS1編碼的蛋白質理論分子量為40 448.58Da,等電點為5.05;BnANS2編碼的蛋白質理論分子量為40 468.52Da,等電點為5.04.比較這2箇ANS基因拷貝編碼的蛋白質序列,髮現有9箇多態性位點.這2箇ANS拷貝在黑芥的種皮和胚中均檢測到錶達.穫得瞭1對ANS引物,能從白菜、黑芥、甘藍、芥菜型油菜、甘藍型油菜和埃塞俄比亞芥中,用等位特異PCR方法特異識彆來自蕓薹屬B基因組的ANS基因.
이용동원극륭방법극륭흑개ANS기인,획득2개ANS기인고패BnANS1화BnANS2,장도분별위1 366bp화1 367bp.저2개기인도유1개76bp적내함자.비교BnAⅣS1화BnANS2기인서렬,발현재편마구、5'여3'비편마구화내함자구역도유다태성,5'비편마구유3개감기적다태성화4개감기적결실,편마구유26개감기적다태성;내함자유2개감기적다태성;3'비편마구유18개감기적다태성화3개감기적삽입.저2개ANS고패도편마356개안기산적단백,구유기타물충동양적ANS단백보수결구역,속우2OG-Fe(Ⅱ)가양매초가족.BnANS1편마적단백질이론분자량위40 448.58Da,등전점위5.05;BnANS2편마적단백질이론분자량위40 468.52Da,등전점위5.04.비교저2개ANS기인고패편마적단백질서렬,발현유9개다태성위점.저2개ANS고패재흑개적충피화배중균검측도표체.획득료1대ANS인물,능종백채、흑개、감람、개채형유채、감람형유채화애새아비아개중,용등위특이PCR방법특이식별래자예대속B기인조적ANS기인.
