CAJ | 학술논문

目的:利用高内涵筛选(high-content screening,HCS)、流式细胞术(flow cytometry,FCM)、激光扫描细胞分析术(laser scanning cytometry,LSC)等细胞组学技术对心肌细胞凋亡特征进行研究.方法:缺氧缓冲液处理H9C2心肌细胞,建立体外心肌细胞凋亡模型,以常规DMEM培养为对照组,处理6h后收取细胞行Annexin V-FITC、PI染色,分别利用HCS和FCM检测,分析心肌细胞早、晚期凋亡以及坏死的比例.利用小鼠心脏左前降支结扎,建立心肌梗死在体模型,术后28d收取心脏,进行TUNEL染色,利用HCS和LSC分析心脏组织健存区、交界区和梗死区心肌细胞的凋亡.结果:缺氧缓冲液处理H9C2心肌细胞6h后,HCS和FCM方法均显示早期凋亡细胞缺氧组与DMEM组,差异有统计学意义,分别为[(17.69±2.85)vs.(5.31±0.86)％,P＜0.01]和[(12.18±0.61)vs.(3.08±0.15)％,P＜0.01],晚期凋亡与坏死细胞比例变化不明显,表明缺氧缓冲液处理6h主要诱导心肌细胞早期凋亡.小鼠心肌梗死28d后,HCS和LSC方法均显示心脏梗死区和交界区有凋亡细胞,梗死区更明显,整体凋亡率分别为6.08％和4.35％,健存区无细胞凋亡.结论:HCS和FCM方法能够可靠、稳定和量化评价心肌细胞凋亡,准确区分细胞早、晚期凋亡和坏死,两种方法结果一致；HCS和LSC方法还可分析组织水平的细胞凋亡；而LSC优势在于可明确凋亡细胞的组织定位.
목적:이용고내함사선(high-content screening,HCS)、류식세포술(flow cytometry,FCM)、격광소묘세포분석술(laser scanning cytometry,LSC)등세포조학기술대심기세포조망특정진행연구.방법:결양완충액처리H9C2심기세포,건입체외심기세포조망모형,이상규DMEM배양위대조조,처리6h후수취세포행Annexin V-FITC、PI염색,분별이용HCS화FCM검측,분석심기세포조、만기조망이급배사적비례.이용소서심장좌전강지결찰,건립심기경사재체모형,술후28d수취심장,진행TUNEL염색,이용HCS화LSC분석심장조직건존구、교계구화경사구심기세포적조망.결과:결양완충액처리H9C2심기세포6h후,HCS화FCM방법균현시조기조망세포결양조여DMEM조,차이유통계학의의,분별위[(17.69±2.85)vs.(5.31±0.86)％,P＜0.01]화[(12.18±0.61)vs.(3.08±0.15)％,P＜0.01],만기조망여배사세포비례변화불명현,표명결양완충액처리6h주요유도심기세포조기조망.소서심기경사28d후,HCS화LSC방법균현시심장경사구화교계구유조망세포,경사구경명현,정체조망솔분별위6.08％화4.35％,건존구무세포조망.결론:HCS화FCM방법능구가고、은정화양화평개심기세포조망,준학구분세포조、만기조망화배사,량충방법결과일치；HCS화LSC방법환가분석조직수평적세포조망；이LSC우세재우가명학조망세포적조직정위.