CAJ | 학술논문

为了检测食品中非法添加物苏丹红,采用重氮化法合成了2种苏丹红Ⅰ的衍生物,通过液相色谱-质谱(LC/MS)鉴定后,分别将两种衍生物与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)以及卵清蛋白(OVA)偶联制备完全抗原.紫外光谱表征结果证明衍生成功.将制备的BSA络合物做为免疫原免疫兔子,制备了多克隆抗体.采用方阵法确定了抗体和包被抗原的稀释比例.对影响酶免疫检测方法(ELISA)的因素包括包被液,封闭液,样品稀释液,抗体稀释液,反应时间等进行了优化.在最适反应条件下,以苏丹红质量浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标建立了抑制曲线,线性范围为0.3～23.4 ng/mL,苏丹红Ⅰ的半数抑制率(IC50)为3.0 ng/mL,检测限(LOD)为0.1 ng/mL.交叉反应测试表明,与对位红交叉反应率为140％;与苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红G的交叉反应率分别为1.1％,6.85％,6.5％;与苏丹红Ⅳ的交叉反应率＜0.1％.以辣椒粉为样本,在5 ng/g和20 ng/g添加水平下得到回收率分别为90.4％和96.0％,变异系数分别为1.8％和4.9％.
위료검측식품중비법첨가물소단홍,채용중담화법합성료2충소단홍Ⅰ적연생물,통과액상색보-질보(LC/MS)감정후,분별장량충연생물여재체단백우혈청백단백(BSA)이급란청단백(OVA)우련제비완전항원.자외광보표정결과증명연생성공.장제비적BSA락합물주위면역원면역토자,제비료다극륭항체.채용방진법학정료항체화포피항원적희석비례.대영향매면역검측방법(ELISA)적인소포괄포피액,봉폐액,양품희석액,항체희석액,반응시간등진행료우화.재최괄반응조건하,이소단홍질량농도위횡좌표,흡광도치위종좌표건립료억제곡선,선성범위위0.3～23.4 ng/mL,소단홍Ⅰ적반수억제솔(IC50)위3.0 ng/mL,검측한(LOD)위0.1 ng/mL.교차반응측시표명,여대위홍교차반응솔위140％;여소단홍Ⅱ、소단홍Ⅲ、소단홍G적교차반응솔분별위1.1％,6.85％,6.5％;여소단홍Ⅳ적교차반응솔＜0.1％.이랄초분위양본,재5 ng/g화20 ng/g첨가수평하득도회수솔분별위90.4％화96.0％,변이계수분별위1.8％화4.9％.