CAJ | 학술논문

[目的]探讨Roscovitine同期化供核细胞对食蟹猴—猪异种体细胞核移植胚胎体外发育的影响,为提高灵长类的核移植效率奠定基础.[方法]活体采集4岁雄性食蟹猴的耳组织,经组织块培养获得纯化的食蟹猴耳成纤维细胞,细胞经固定、染色后用流式细胞仪分析细胞周期分布.以不同同期化方法处理的食蟹猴耳纤维细胞为供体细胞,以体外成熟、去核的猪卵母细胞为受体细胞,利用电融合法构建食蟹猴—猪异种核移植胚胎,观察异种核移植重构胚胎的体外发育情况.[结果]以15 μmol/L Roscovitine处理食蟹猴耳成纤维细胞24、48、72 h获得的G0/G1期细胞比率分别为76.51％、89.69％和90.49％,其中处理48和72h的G0/G1期细胞比率显著高于对照组(P＜0.05).血清饥饿、接触抑制72 h同期化获得的G0/G1期细胞比率分别为91.12％和90.46％.Roscovitine同期化处理食蟹猴耳成纤维细胞48 h可有效提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率(15.05％),显著高于血清饥饿同期化处理和接触抑制同期化处理的效果(P＜0.05).[结论]Roscovitine可有效同期化食蟹猴耳成纤维细胞在G0/G1期,最终提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率.
[목적]탐토Roscovitine동기화공핵세포대식해후—저이충체세포핵이식배태체외발육적영향,위제고령장류적핵이식효솔전정기출.[방법]활체채집4세웅성식해후적이조직,경조직괴배양획득순화적식해후이성섬유세포,세포경고정、염색후용류식세포의분석세포주기분포.이불동동기화방법처리적식해후이섬유세포위공체세포,이체외성숙、거핵적저란모세포위수체세포,이용전융합법구건식해후—저이충핵이식배태,관찰이충핵이식중구배태적체외발육정황.[결과]이15 μmol/L Roscovitine처리식해후이성섬유세포24、48、72 h획득적G0/G1기세포비솔분별위76.51％、89.69％화90.49％,기중처리48화72h적G0/G1기세포비솔현저고우대조조(P＜0.05).혈청기아、접촉억제72 h동기화획득적G0/G1기세포비솔분별위91.12％화90.46％.Roscovitine동기화처리식해후이성섬유세포48 h가유효제고식해후—저이충핵이식중구배태적낭배형성솔(15.05％),현저고우혈청기아동기화처리화접촉억제동기화처리적효과(P＜0.05).[결론]Roscovitine가유효동기화식해후이성섬유세포재G0/G1기,최종제고식해후—저이충핵이식중구배태적낭배형성솔.