中国医药
中國醫藥
중국의약
CHINA MEDICINE
2014年
6期
826-830
,共5页
高血糖症%血红素氧合酶1%内皮细胞%细胞凋亡
高血糖癥%血紅素氧閤酶1%內皮細胞%細胞凋亡
고혈당증%혈홍소양합매1%내피세포%세포조망
Hyperglycemia%Heme oxygenase-1%Endothelial Cells%Apoptosis
目的 探讨血红素氧合酶1对高血糖和波动性高血糖诱导内皮细胞凋亡的影响.方法 以未转染及转染血红素氧合酶1基因的人脐静脉内皮细胞为研究对象,实验分正常葡萄糖组、波动性高血糖组、正常葡萄糖/血红素氧合酶1组、稳定性高血糖/血红素氧合酶1组及波动性高血糖/血红素氧合酶1组.细胞分别置于含正常浓度葡萄糖(5.5 mmol/L)、稳定性高浓度葡萄糖(20.0 mmol/L)和波动性高浓度葡萄糖(5.5或20.0mmol/L)的培养基,培养7d后用噻唑蓝(MTT)方法检测细胞存活率,吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色法检测细胞凋亡,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关基因bax、bcl-2 mRNA的表达.结果 转染内皮细胞血红素氧合酶1 mRNA表达量明显高于未转染内皮细胞[(0.91 ±0.29)比(0.43 ±0.14),P＜0.05].正常葡萄糖组、正常葡萄糖/血红素氧合酶1组、稳定性高血糖组、稳定性高血糖/血红素氧合酶1组、波动性高血糖组、波动性高血糖/血红素氧合酶1组细胞存活率分别为(100 ±22)％、(1 10 ± 19)％、(79 ± 11)％、(108 ±27)％、(59±13)％、(87 ± 9)％,凋亡细胞数分别为(33 ± 7)、(32 ±7)、(53 ±5)、(35 ±7)、(59 ±7)、(48 ±7).稳定性高血糖组和波动性高血糖组细胞存活率较正常葡萄糖组明显下降(P＜0.05或P＜0.01),且波动性高血糖组细胞存活率下降更为明显(P＜0.05);稳定性高血糖/血红素氧合酶组及波动足性高血糖/血红素氧合酶组细胞存活率较稳定性高血糖组及波动性高血糖组均提高(P＜0.05).正常葡萄糖组、正常葡萄糖/血红素氧合酶1组、稳定性高血糖组、稳定性高血糖/血红素氧合酶1组、波动性高血糖组、波动性高血糖/血红素氧合酶1组bax/β-actin表达分别为(1.27 ±0.32)、(1.26 ±0.35)、(1.13 ±0.32)、(1.13 ±0.39)、(1.32 ±0.45)、(1.31 ±0.41),bcl-2/β-actin表达分别为(1.35 ±0.39)、(1.31 ±0.34)、(0.77 ±0.35)、(1.34 ±0.46)、(0.20 ±0.12)、(0.82 ±0.23).稳定性高血糖组与波动性高血糖组bcl-2的表达比正常葡萄糖组明显减弱(P＜0.05或P＜0.01),与稳定性高血糖组和波动性高血糖组相比,稳定性高血糖/血红素氧合酶1组、波动性高血糖/血红素氧合酶1组bcl-2 mRNA表达增强(P＜0.01).结论 血红素氧合酶1基因的表达上调可减轻高血糖和波动性高血糖引起的血管内皮细胞凋亡,其机制与bcl-2的表达上调有关.
目的 探討血紅素氧閤酶1對高血糖和波動性高血糖誘導內皮細胞凋亡的影響.方法 以未轉染及轉染血紅素氧閤酶1基因的人臍靜脈內皮細胞為研究對象,實驗分正常葡萄糖組、波動性高血糖組、正常葡萄糖/血紅素氧閤酶1組、穩定性高血糖/血紅素氧閤酶1組及波動性高血糖/血紅素氧閤酶1組.細胞分彆置于含正常濃度葡萄糖(5.5 mmol/L)、穩定性高濃度葡萄糖(20.0 mmol/L)和波動性高濃度葡萄糖(5.5或20.0mmol/L)的培養基,培養7d後用噻唑藍(MTT)方法檢測細胞存活率,吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色法檢測細胞凋亡,逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測凋亡相關基因bax、bcl-2 mRNA的錶達.結果 轉染內皮細胞血紅素氧閤酶1 mRNA錶達量明顯高于未轉染內皮細胞[(0.91 ±0.29)比(0.43 ±0.14),P＜0.05].正常葡萄糖組、正常葡萄糖/血紅素氧閤酶1組、穩定性高血糖組、穩定性高血糖/血紅素氧閤酶1組、波動性高血糖組、波動性高血糖/血紅素氧閤酶1組細胞存活率分彆為(100 ±22)％、(1 10 ± 19)％、(79 ± 11)％、(108 ±27)％、(59±13)％、(87 ± 9)％,凋亡細胞數分彆為(33 ± 7)、(32 ±7)、(53 ±5)、(35 ±7)、(59 ±7)、(48 ±7).穩定性高血糖組和波動性高血糖組細胞存活率較正常葡萄糖組明顯下降(P＜0.05或P＜0.01),且波動性高血糖組細胞存活率下降更為明顯(P＜0.05);穩定性高血糖/血紅素氧閤酶組及波動足性高血糖/血紅素氧閤酶組細胞存活率較穩定性高血糖組及波動性高血糖組均提高(P＜0.05).正常葡萄糖組、正常葡萄糖/血紅素氧閤酶1組、穩定性高血糖組、穩定性高血糖/血紅素氧閤酶1組、波動性高血糖組、波動性高血糖/血紅素氧閤酶1組bax/β-actin錶達分彆為(1.27 ±0.32)、(1.26 ±0.35)、(1.13 ±0.32)、(1.13 ±0.39)、(1.32 ±0.45)、(1.31 ±0.41),bcl-2/β-actin錶達分彆為(1.35 ±0.39)、(1.31 ±0.34)、(0.77 ±0.35)、(1.34 ±0.46)、(0.20 ±0.12)、(0.82 ±0.23).穩定性高血糖組與波動性高血糖組bcl-2的錶達比正常葡萄糖組明顯減弱(P＜0.05或P＜0.01),與穩定性高血糖組和波動性高血糖組相比,穩定性高血糖/血紅素氧閤酶1組、波動性高血糖/血紅素氧閤酶1組bcl-2 mRNA錶達增彊(P＜0.01).結論 血紅素氧閤酶1基因的錶達上調可減輕高血糖和波動性高血糖引起的血管內皮細胞凋亡,其機製與bcl-2的錶達上調有關.
목적 탐토혈홍소양합매1대고혈당화파동성고혈당유도내피세포조망적영향.방법 이미전염급전염혈홍소양합매1기인적인제정맥내피세포위연구대상,실험분정상포도당조、파동성고혈당조、정상포도당/혈홍소양합매1조、은정성고혈당/혈홍소양합매1조급파동성고혈당/혈홍소양합매1조.세포분별치우함정상농도포도당(5.5 mmol/L)、은정성고농도포도당(20.0 mmol/L)화파동성고농도포도당(5.5혹20.0mmol/L)적배양기,배양7d후용새서람(MTT)방법검측세포존활솔,아정등/추을정(AO/EB)염색법검측세포조망,역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측조망상관기인bax、bcl-2 mRNA적표체.결과 전염내피세포혈홍소양합매1 mRNA표체량명현고우미전염내피세포[(0.91 ±0.29)비(0.43 ±0.14),P＜0.05].정상포도당조、정상포도당/혈홍소양합매1조、은정성고혈당조、은정성고혈당/혈홍소양합매1조、파동성고혈당조、파동성고혈당/혈홍소양합매1조세포존활솔분별위(100 ±22)％、(1 10 ± 19)％、(79 ± 11)％、(108 ±27)％、(59±13)％、(87 ± 9)％,조망세포수분별위(33 ± 7)、(32 ±7)、(53 ±5)、(35 ±7)、(59 ±7)、(48 ±7).은정성고혈당조화파동성고혈당조세포존활솔교정상포도당조명현하강(P＜0.05혹P＜0.01),차파동성고혈당조세포존활솔하강경위명현(P＜0.05);은정성고혈당/혈홍소양합매조급파동족성고혈당/혈홍소양합매조세포존활솔교은정성고혈당조급파동성고혈당조균제고(P＜0.05).정상포도당조、정상포도당/혈홍소양합매1조、은정성고혈당조、은정성고혈당/혈홍소양합매1조、파동성고혈당조、파동성고혈당/혈홍소양합매1조bax/β-actin표체분별위(1.27 ±0.32)、(1.26 ±0.35)、(1.13 ±0.32)、(1.13 ±0.39)、(1.32 ±0.45)、(1.31 ±0.41),bcl-2/β-actin표체분별위(1.35 ±0.39)、(1.31 ±0.34)、(0.77 ±0.35)、(1.34 ±0.46)、(0.20 ±0.12)、(0.82 ±0.23).은정성고혈당조여파동성고혈당조bcl-2적표체비정상포도당조명현감약(P＜0.05혹P＜0.01),여은정성고혈당조화파동성고혈당조상비,은정성고혈당/혈홍소양합매1조、파동성고혈당/혈홍소양합매1조bcl-2 mRNA표체증강(P＜0.01).결론 혈홍소양합매1기인적표체상조가감경고혈당화파동성고혈당인기적혈관내피세포조망,기궤제여bcl-2적표체상조유관.
Objective To investigate the effect of heme oxygenase-1 (HO-1) on apoptosis of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induced by constant high blood glucose and intermittent high blood glucose.Methods Untransfected HUVECs and transfected HUVECs were exposed for 7 days to 5.5 mmol/L lD-glucose (normal glucose),20.0 mmol/L D-glucose (constant high blood glucose) and 5.5 mmol/L alternating with 20.0 mmol/L D-glucose every 24 hours (intermittent high blood glucose),respectively.The cell viability was determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay.Cell apoptosis was detected by acridine orange (AO)/ethdium bromide (EB) staining.The mRNA expression of bax and bcl-2 was evaluated by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis.Results Compared with untransfected HUVECs,the expression level of HO-1 mRNA was increased significantly in transfected HUVECs [(0.91 ± 0.29) vs (0.43 ± 0.14),P ＜ 0.05].Transfected HUVECs showed higher viability (108 ± 27,87 ± 9)than untransfected HUVECs(P ＜ 0.05).Transfected HUVECs had a lower apoptotic cells(35.0,48.0) than untransfected HUVECs(P ＜0.05).Transfected HUVECs had higher mRNA expression of bcl-2 compared with untransfected HUVECs.Conclusion The up-regulation of gene HO-1 protect HUVECs from apoptosis induced by constant high glucose and intermittent high glucose is associated with the up-regulation of bcl-2 expression.
