中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
11期
886-890
,共5页
高洋%程子英%王铭%郑君%贾洪林%鲁承
高洋%程子英%王銘%鄭君%賈洪林%魯承
고양%정자영%왕명%정군%가홍림%로승
弓形虫%SAG1%GRA4%猫疱疹病毒Ⅰ型%转移载体
弓形蟲%SAG1%GRA4%貓皰疹病毒Ⅰ型%轉移載體
궁형충%SAG1%GRA4%묘포진병독Ⅰ형%전이재체
Toxoplasma gondii%SAG1%GRA4%feline herpes virus type Ⅰ%transfer vectors
为构建表达弓形虫抗原的重组猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)转移载体,本研究以pBluescipt Ⅱ-SK(-)为骨架载体,分别插入FHV-1 TK基因的5’(2 000 bp)和3’(1 700 bp)同源臂、pCAGGs载体中含有启动子和终止信号的表达盒以及弓形虫RH株SAG1或GRA4基因,构建重组FHV-1的转移载体pBS-TK-SAG1和pBS-TK-GRA4.将其分别转染于293T细胞,通过原核细胞表达的截短SAG1和GRA4重组蛋白制备的鼠多克隆抗体进行westernblot鉴定.结果显示,制备的弓形虫SAG1和GRA4多克隆抗体能够特异性识别重组表达和虫体表达的天然的SAG1和GRA4两种弓形虫蛋白,分子量一致,分别为35 ku和45 ku.本研究为表达弓形虫RH株SAG1和GRA4基因的猫重组疱疹病毒Ⅰ型载体疫苗的研制奠定了基础.
為構建錶達弓形蟲抗原的重組貓皰疹病毒Ⅰ型(FHV-1)轉移載體,本研究以pBluescipt Ⅱ-SK(-)為骨架載體,分彆插入FHV-1 TK基因的5’(2 000 bp)和3’(1 700 bp)同源臂、pCAGGs載體中含有啟動子和終止信號的錶達盒以及弓形蟲RH株SAG1或GRA4基因,構建重組FHV-1的轉移載體pBS-TK-SAG1和pBS-TK-GRA4.將其分彆轉染于293T細胞,通過原覈細胞錶達的截短SAG1和GRA4重組蛋白製備的鼠多剋隆抗體進行westernblot鑒定.結果顯示,製備的弓形蟲SAG1和GRA4多剋隆抗體能夠特異性識彆重組錶達和蟲體錶達的天然的SAG1和GRA4兩種弓形蟲蛋白,分子量一緻,分彆為35 ku和45 ku.本研究為錶達弓形蟲RH株SAG1和GRA4基因的貓重組皰疹病毒Ⅰ型載體疫苗的研製奠定瞭基礎.
위구건표체궁형충항원적중조묘포진병독Ⅰ형(FHV-1)전이재체,본연구이pBluescipt Ⅱ-SK(-)위골가재체,분별삽입FHV-1 TK기인적5’(2 000 bp)화3’(1 700 bp)동원비、pCAGGs재체중함유계동자화종지신호적표체합이급궁형충RH주SAG1혹GRA4기인,구건중조FHV-1적전이재체pBS-TK-SAG1화pBS-TK-GRA4.장기분별전염우293T세포,통과원핵세포표체적절단SAG1화GRA4중조단백제비적서다극륭항체진행westernblot감정.결과현시,제비적궁형충SAG1화GRA4다극륭항체능구특이성식별중조표체화충체표체적천연적SAG1화GRA4량충궁형충단백,분자량일치,분별위35 ku화45 ku.본연구위표체궁형충RH주SAG1화GRA4기인적묘중조포진병독Ⅰ형재체역묘적연제전정료기출.
