中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
11期
878-881
,共4页
李跃峰%张俊波%监通%贺志锐%王讲德%张辉%陈创夫%曹旭东
李躍峰%張俊波%鑑通%賀誌銳%王講德%張輝%陳創伕%曹旭東
리약봉%장준파%감통%하지예%왕강덕%장휘%진창부%조욱동
结核病%CFP10%ESAT6
結覈病%CFP10%ESAT6
결핵병%CFP10%ESAT6
tuberculosis%CFP10%ESAT6
为研究结核杆菌毒力因子CFP10在结核杆菌感染细胞过程中的功能,本研究根据GenBank中登录的结核杆菌H37Rv的CFP10基因序列设计1对引物,以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增得到CFP10基因DNA片段.将扩增片段克隆于pGM18-T载体中,测序验证后,再将CFP10基因亚克隆至pEGFp-N1中,经核苷酸序列测定和酶切鉴定获得重组表达质粒pEGFP-N1-CFP10,分别转染293T细胞和U937细胞.经western blot分析表明CFP10-EGFP融合蛋白在293T细胞和U937细胞中均获得了表达.通过激光共聚焦显微镜观察显示在293T细胞和U937细胞,CFP10-EGFP融合蛋白主要分布于细胞质.本研究为进一步研究毒力因子CFP10在感染宿主细胞中的作用奠定了基础.
為研究結覈桿菌毒力因子CFP10在結覈桿菌感染細胞過程中的功能,本研究根據GenBank中登錄的結覈桿菌H37Rv的CFP10基因序列設計1對引物,以結覈桿菌H37Rv基因組DNA為模闆,PCR擴增得到CFP10基因DNA片段.將擴增片段剋隆于pGM18-T載體中,測序驗證後,再將CFP10基因亞剋隆至pEGFp-N1中,經覈苷痠序列測定和酶切鑒定穫得重組錶達質粒pEGFP-N1-CFP10,分彆轉染293T細胞和U937細胞.經western blot分析錶明CFP10-EGFP融閤蛋白在293T細胞和U937細胞中均穫得瞭錶達.通過激光共聚焦顯微鏡觀察顯示在293T細胞和U937細胞,CFP10-EGFP融閤蛋白主要分佈于細胞質.本研究為進一步研究毒力因子CFP10在感染宿主細胞中的作用奠定瞭基礎.
위연구결핵간균독력인자CFP10재결핵간균감염세포과정중적공능,본연구근거GenBank중등록적결핵간균H37Rv적CFP10기인서렬설계1대인물,이결핵간균H37Rv기인조DNA위모판,PCR확증득도CFP10기인DNA편단.장확증편단극륭우pGM18-T재체중,측서험증후,재장CFP10기인아극륭지pEGFp-N1중,경핵감산서렬측정화매절감정획득중조표체질립pEGFP-N1-CFP10,분별전염293T세포화U937세포.경western blot분석표명CFP10-EGFP융합단백재293T세포화U937세포중균획득료표체.통과격광공취초현미경관찰현시재293T세포화U937세포,CFP10-EGFP융합단백주요분포우세포질.본연구위진일보연구독력인자CFP10재감염숙주세포중적작용전정료기출.
