西南民族大学学报(自然科学版)
西南民族大學學報(自然科學版)
서남민족대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTHWEST NATIONALITIES COLLEGE·NATURAL SCIENCE EDITION
2013年
3期
315-321
,共7页
安莉颖%施思%秦丽娜%陈飞%董志扬%伍红
安莉穎%施思%秦麗娜%陳飛%董誌颺%伍紅
안리영%시사%진려나%진비%동지양%오홍
里氏木霉%几丁质酶%β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶%nagl
裏氏木黴%幾丁質酶%β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶%nagl
리씨목매%궤정질매%β-N-을선안기포도당감매%nagl
丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei)外切几丁质酶具有β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性.根据里氏木霉基因组数据库获得了一个编号为21725的外切几丁质酶nagl基因序列,根据检索结果,从里氏木霉QM9414基因组DNA中克隆获得1.9kb的基因片段.构建了以cbhl为启动子和终止子的重组质粒pCbhNag,与含有pyr4基因的质粒pSKpyr4共转化里氏木霉pyr4缺陷株RutC30△U3.共得到99个转化子,初筛得到5株乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活较高的转化子,其中N3菌株的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活可达26.65 U/mL,而出发菌株的胞外几丁质酶几乎无酶活.成功实现了里氏木霉几丁质酶的克隆及同源表达.
絲狀真菌裏氏木黴(Trichoderma reesei)外切幾丁質酶具有β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性.根據裏氏木黴基因組數據庫穫得瞭一箇編號為21725的外切幾丁質酶nagl基因序列,根據檢索結果,從裏氏木黴QM9414基因組DNA中剋隆穫得1.9kb的基因片段.構建瞭以cbhl為啟動子和終止子的重組質粒pCbhNag,與含有pyr4基因的質粒pSKpyr4共轉化裏氏木黴pyr4缺陷株RutC30△U3.共得到99箇轉化子,初篩得到5株乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活較高的轉化子,其中N3菌株的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活可達26.65 U/mL,而齣髮菌株的胞外幾丁質酶幾乎無酶活.成功實現瞭裏氏木黴幾丁質酶的剋隆及同源錶達.
사상진균리씨목매(Trichoderma reesei)외절궤정질매구유β-N-을선안기포도당감매활성.근거리씨목매기인조수거고획득료일개편호위21725적외절궤정질매nagl기인서렬,근거검색결과,종리씨목매QM9414기인조DNA중극륭획득1.9kb적기인편단.구건료이cbhl위계동자화종지자적중조질립pCbhNag,여함유pyr4기인적질립pSKpyr4공전화리씨목매pyr4결함주RutC30△U3.공득도99개전화자,초사득도5주을선안기포도당감매매활교고적전화자,기중N3균주적β-N-을선안기포도당감매매활가체26.65 U/mL,이출발균주적포외궤정질매궤호무매활.성공실현료리씨목매궤정질매적극륭급동원표체.