CAJ | 학술논문

以新鲜中国人乳为研究对象,在酸性条件下加氯化钙分离酪蛋白,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法测定分离效果.从pH值、离心力和CaCl2浓度等3个方面对分离效果进行评价.结果表明:当pH =4.3,离心力为10 400 g,CaCl2溶液浓度为60 mmol/L时,分离得到的酪蛋白组分纯度最高.对所得酪蛋白沉淀进行DEAE阴离子交换色谱分离,得到3个洗脱液.对其中第3个峰进行Western-Blot法及基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱法(MALDI-TOF/TOF MS)鉴定,证明该峰能与人β-酪蛋白抗体特异性结合,确认其为人乳β-酪蛋白；将质谱结果在Mascot数据库中进行数据检索,序列覆盖率为50％,进一步确定其为人乳β-酪蛋白.综上所述,我们建立了能够得到符合蛋白质组学研究要求的人乳β-酪蛋白的方法.
이신선중국인유위연구대상,재산성조건하가록화개분리락단백,용십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)법측정분리효과.종pH치、리심력화CaCl2농도등3개방면대분리효과진행평개.결과표명:당pH =4.3,리심력위10 400 g,CaCl2용액농도위60 mmol/L시,분리득도적락단백조분순도최고.대소득락단백침정진행DEAE음리자교환색보분리,득도3개세탈액.대기중제3개봉진행Western-Blot법급기질보조격광해흡전리천련비행시간질보법(MALDI-TOF/TOF MS)감정,증명해봉능여인β-락단백항체특이성결합,학인기위인유β-락단백；장질보결과재Mascot수거고중진행수거검색,서렬복개솔위50％,진일보학정기위인유β-락단백.종상소술,아문건립료능구득도부합단백질조학연구요구적인유β-락단백적방법.