农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2013年
5期
505-510
,共6页
王忠%汪仁%彭峰%何树兰%郑玉红
王忠%汪仁%彭峰%何樹蘭%鄭玉紅
왕충%왕인%팽봉%하수란%정옥홍
北美海蓬子%盐胁迫%cDNA文库
北美海蓬子%鹽脅迫%cDNA文庫
북미해봉자%염협박%cDNA문고
盐生植物北美海蓬子(Salicornia bigelovii Torr.)是世界上最具耐盐性的植物之一,为了研究其耐盐机理和获得新的耐盐基因,本研究利用SMARTTM(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术构建了北美海蓬子在盐胁迫下的全长cDNA文库.原始文库滴度为5.46× 105 pfu/mL,重组率为96.5%,插入片段长度在0.5~2 kb,1kb以上的占60%.从原始文库中随机挑取100个阳性克隆进行序列分析,获得65条高质量的基因序列.通过检索后发现其中有些是逆境应答相关基因和新基因.此外,以400 mmol/LNaC1处理的北美海蓬子为模板,对文库中与耐盐相关的SbX和SbSAMS进行RT-PCR分析,发现随着胁迫时间的延长,海蓬子体内的SbX表达量上调,而SbSAMS的表达量则逐渐减弱.研究结果为植物耐盐性机理、农作物遗传性状改良和种质创新提供基础资料.
鹽生植物北美海蓬子(Salicornia bigelovii Torr.)是世界上最具耐鹽性的植物之一,為瞭研究其耐鹽機理和穫得新的耐鹽基因,本研究利用SMARTTM(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技術構建瞭北美海蓬子在鹽脅迫下的全長cDNA文庫.原始文庫滴度為5.46× 105 pfu/mL,重組率為96.5%,插入片段長度在0.5~2 kb,1kb以上的佔60%.從原始文庫中隨機挑取100箇暘性剋隆進行序列分析,穫得65條高質量的基因序列.通過檢索後髮現其中有些是逆境應答相關基因和新基因.此外,以400 mmol/LNaC1處理的北美海蓬子為模闆,對文庫中與耐鹽相關的SbX和SbSAMS進行RT-PCR分析,髮現隨著脅迫時間的延長,海蓬子體內的SbX錶達量上調,而SbSAMS的錶達量則逐漸減弱.研究結果為植物耐鹽性機理、農作物遺傳性狀改良和種質創新提供基礎資料.
염생식물북미해봉자(Salicornia bigelovii Torr.)시세계상최구내염성적식물지일,위료연구기내염궤리화획득신적내염기인,본연구이용SMARTTM(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)기술구건료북미해봉자재염협박하적전장cDNA문고.원시문고적도위5.46× 105 pfu/mL,중조솔위96.5%,삽입편단장도재0.5~2 kb,1kb이상적점60%.종원시문고중수궤도취100개양성극륭진행서렬분석,획득65조고질량적기인서렬.통과검색후발현기중유사시역경응답상관기인화신기인.차외,이400 mmol/LNaC1처리적북미해봉자위모판,대문고중여내염상관적SbX화SbSAMS진행RT-PCR분석,발현수착협박시간적연장,해봉자체내적SbX표체량상조,이SbSAMS적표체량칙축점감약.연구결과위식물내염성궤리、농작물유전성상개량화충질창신제공기출자료.