检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2013年
5期
425-429
,共5页
侯利丹%刘鹭雯%何怡青%杨翠霞%杜艳%高锋
侯利丹%劉鷺雯%何怡青%楊翠霞%杜豔%高鋒
후리단%류로문%하이청%양취하%두염%고봉
CD44%活化状态%乳腺肿瘤%外周血单个核细胞
CD44%活化狀態%乳腺腫瘤%外週血單箇覈細胞
CD44%활화상태%유선종류%외주혈단개핵세포
目的 检测黏附分子CD44在正常和乳腺肿瘤细胞表面的表达,并分析其活化状态差异,为以CD44为靶点的肿瘤靶向治疗提供新的理论依据.方法 采用流式细胞术检测20名正常人外周血单个核细胞(PBMCs)、正常小鼠胚细胞NIH3T3及人乳腺肿瘤细胞Hs578T、BT-549表面CD44表达水平;使用荧光标记透明质酸(FL-HA),通过流式细胞术分析CD44的活化状态;再运用细胞免疫荧光的方法观察HA与不同活化状态CD44的靶向结合情况.结果 正常人PBMCs、NIH3T3与乳腺肿瘤细胞Hs578T、BT-549表面均高表达CD44,阳性表达率>95%.PBMCs、NIH3T3的CD44与FL-HA结合活性相对较低,分别为(3.61±2.65)%和(14.33±1.35)%,而乳腺肿瘤细胞表面CD44与FL-HA结合活性高(>90%).细胞免疫荧光显示NIH3T3细胞表面基本无荧光,HA不靶向结合CD44,而Hs578T和BT-549细胞表面呈现强荧光,HA靶向结合CD44.结论 正常细胞PBMCs、NIH3T3表面虽然高表达CD44,但与其天然配体HA结合活性较低,而乳腺肿瘤细胞表面高表达CD44且与其配体HA结合活性很高.提示CD44分子在正常和肿瘤细胞表面存在相对静止与活化2种状态,前者与HA结合活性较低,后者与HA结合活性高.提示以HA为靶向分子、CD44为靶点的抗肿瘤药物,能够选择性杀伤高表达CD44的肿瘤细胞而不影响正常细胞.
目的 檢測黏附分子CD44在正常和乳腺腫瘤細胞錶麵的錶達,併分析其活化狀態差異,為以CD44為靶點的腫瘤靶嚮治療提供新的理論依據.方法 採用流式細胞術檢測20名正常人外週血單箇覈細胞(PBMCs)、正常小鼠胚細胞NIH3T3及人乳腺腫瘤細胞Hs578T、BT-549錶麵CD44錶達水平;使用熒光標記透明質痠(FL-HA),通過流式細胞術分析CD44的活化狀態;再運用細胞免疫熒光的方法觀察HA與不同活化狀態CD44的靶嚮結閤情況.結果 正常人PBMCs、NIH3T3與乳腺腫瘤細胞Hs578T、BT-549錶麵均高錶達CD44,暘性錶達率>95%.PBMCs、NIH3T3的CD44與FL-HA結閤活性相對較低,分彆為(3.61±2.65)%和(14.33±1.35)%,而乳腺腫瘤細胞錶麵CD44與FL-HA結閤活性高(>90%).細胞免疫熒光顯示NIH3T3細胞錶麵基本無熒光,HA不靶嚮結閤CD44,而Hs578T和BT-549細胞錶麵呈現彊熒光,HA靶嚮結閤CD44.結論 正常細胞PBMCs、NIH3T3錶麵雖然高錶達CD44,但與其天然配體HA結閤活性較低,而乳腺腫瘤細胞錶麵高錶達CD44且與其配體HA結閤活性很高.提示CD44分子在正常和腫瘤細胞錶麵存在相對靜止與活化2種狀態,前者與HA結閤活性較低,後者與HA結閤活性高.提示以HA為靶嚮分子、CD44為靶點的抗腫瘤藥物,能夠選擇性殺傷高錶達CD44的腫瘤細胞而不影響正常細胞.
목적 검측점부분자CD44재정상화유선종류세포표면적표체,병분석기활화상태차이,위이CD44위파점적종류파향치료제공신적이론의거.방법 채용류식세포술검측20명정상인외주혈단개핵세포(PBMCs)、정상소서배세포NIH3T3급인유선종류세포Hs578T、BT-549표면CD44표체수평;사용형광표기투명질산(FL-HA),통과류식세포술분석CD44적활화상태;재운용세포면역형광적방법관찰HA여불동활화상태CD44적파향결합정황.결과 정상인PBMCs、NIH3T3여유선종류세포Hs578T、BT-549표면균고표체CD44,양성표체솔>95%.PBMCs、NIH3T3적CD44여FL-HA결합활성상대교저,분별위(3.61±2.65)%화(14.33±1.35)%,이유선종류세포표면CD44여FL-HA결합활성고(>90%).세포면역형광현시NIH3T3세포표면기본무형광,HA불파향결합CD44,이Hs578T화BT-549세포표면정현강형광,HA파향결합CD44.결론 정상세포PBMCs、NIH3T3표면수연고표체CD44,단여기천연배체HA결합활성교저,이유선종류세포표면고표체CD44차여기배체HA결합활성흔고.제시CD44분자재정상화종류세포표면존재상대정지여활화2충상태,전자여HA결합활성교저,후자여HA결합활성고.제시이HA위파향분자、CD44위파점적항종류약물,능구선택성살상고표체CD44적종류세포이불영향정상세포.