CAJ | 학술논문

多基因共转化有利于对植物复杂性状进行改良.本研究通过在pXCS-HAStrep质粒中引入一段间隔序列,构建了双基因共表达载体pXCS-Dgene-HAStrep,实现了在一套表达盒内独立表达两个基因,并将克隆自橡胶树(Hevea brasiliensis)的Hb WRKY11和Hb WRKY7基因克隆入该载体,利用农杆菌(Agrobacterium tumefacien)介导法将构建好的共表达载体pXCS-HbWRKY1 1-Hb WRKY7-HAStrep转入野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana),共获得了84株抗Basta除草剂的拟南芥转基因植株.对随机选择的8株转基因植株进行半定量和荧光定量PCR分析表明,Hb WRKY11和HbWRKY7基因能同时独立表达,Hb WRKY7的表达量略高于Hb WRKY11,但差异不显著(Pr=0.4867＞0.05);而在不同的转基因植株间,基因的表达差异显著,其中单拷贝的转基因株系S2和S5表达量最高.对双基因共表达株系S2和S5及Hb WRKY11和Hb WRKY7的单基因转基因株系L3、L4、J1和J5进行低温和茉莉酸胁迫处理,结果表明,冷应答基因AtCOR47和茉莉酸应答基因AtCO11及可溶性糖含量在双基因共表达株系中的变化特征与其在单基因转基因株系中的变化特征均表现出明显的差异.实验证明,本研究所构建的双基因共表达载体可以在植物转化中实现一个表达框内独立表达两个基因.
다기인공전화유리우대식물복잡성상진행개량.본연구통과재pXCS-HAStrep질립중인입일단간격서렬,구건료쌍기인공표체재체pXCS-Dgene-HAStrep,실현료재일투표체합내독립표체량개기인,병장극륭자상효수(Hevea brasiliensis)적Hb WRKY11화Hb WRKY7기인극륭입해재체,이용농간균(Agrobacterium tumefacien)개도법장구건호적공표체재체pXCS-HbWRKY1 1-Hb WRKY7-HAStrep전입야생형의남개(Arabidopsis thaliana),공획득료84주항Basta제초제적의남개전기인식주.대수궤선택적8주전기인식주진행반정량화형광정량PCR분석표명,Hb WRKY11화HbWRKY7기인능동시독립표체,Hb WRKY7적표체량략고우Hb WRKY11,단차이불현저(Pr=0.4867＞0.05);이재불동적전기인식주간,기인적표체차이현저,기중단고패적전기인주계S2화S5표체량최고.대쌍기인공표체주계S2화S5급Hb WRKY11화Hb WRKY7적단기인전기인주계L3、L4、J1화J5진행저온화말리산협박처리,결과표명,랭응답기인AtCOR47화말리산응답기인AtCO11급가용성당함량재쌍기인공표체주계중적변화특정여기재단기인전기인주계중적변화특정균표현출명현적차이.실험증명,본연구소구건적쌍기인공표체재체가이재식물전화중실현일개표체광내독립표체량개기인.