安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2013年
7期
764-768
,共5页
吴冬%刘尚全%袁媛%张维娜%李菲
吳鼕%劉尚全%袁媛%張維娜%李菲
오동%류상전%원원%장유나%리비
信号肽%GLP-1%基因表达
信號肽%GLP-1%基因錶達
신호태%GLP-1%기인표체
目的 观察不同信号肽对重组胰高血糖素样肽-1(GLP-1)分泌的影响,筛选高效表达GLP-1的信号肽.方法 构建GFP-GCG-GLP-1、GFP-NT4-GLP-1、GFP-EX4-GLP-1重组质粒,根据信号肽不同分为阴性对照(NC)、空载、EX4、NT4和GCG组.使用Vigofect试剂盒转染HEK293T细胞;RT-PCR分析转染后HEK293T细胞GLP-1 mRNA表达水平;ELISA法测定转染后培养基上清液中GLP-1水平.结果 转染24 h后HEK293T细胞,检测EX4、NT4、GCG组GLP-1 mRNA水平差异无统计学意义,与NT4、GCG组比较,培养基上清液中EX4组GLP-1蛋白浓度升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 3种信号肽均能引导GLP-1分泌表达,EX-4信号肽引导效率最佳.
目的 觀察不同信號肽對重組胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)分泌的影響,篩選高效錶達GLP-1的信號肽.方法 構建GFP-GCG-GLP-1、GFP-NT4-GLP-1、GFP-EX4-GLP-1重組質粒,根據信號肽不同分為陰性對照(NC)、空載、EX4、NT4和GCG組.使用Vigofect試劑盒轉染HEK293T細胞;RT-PCR分析轉染後HEK293T細胞GLP-1 mRNA錶達水平;ELISA法測定轉染後培養基上清液中GLP-1水平.結果 轉染24 h後HEK293T細胞,檢測EX4、NT4、GCG組GLP-1 mRNA水平差異無統計學意義,與NT4、GCG組比較,培養基上清液中EX4組GLP-1蛋白濃度升高,差異有統計學意義(P<0.01).結論 3種信號肽均能引導GLP-1分泌錶達,EX-4信號肽引導效率最佳.
목적 관찰불동신호태대중조이고혈당소양태-1(GLP-1)분비적영향,사선고효표체GLP-1적신호태.방법 구건GFP-GCG-GLP-1、GFP-NT4-GLP-1、GFP-EX4-GLP-1중조질립,근거신호태불동분위음성대조(NC)、공재、EX4、NT4화GCG조.사용Vigofect시제합전염HEK293T세포;RT-PCR분석전염후HEK293T세포GLP-1 mRNA표체수평;ELISA법측정전염후배양기상청액중GLP-1수평.결과 전염24 h후HEK293T세포,검측EX4、NT4、GCG조GLP-1 mRNA수평차이무통계학의의,여NT4、GCG조비교,배양기상청액중EX4조GLP-1단백농도승고,차이유통계학의의(P<0.01).결론 3충신호태균능인도GLP-1분비표체,EX-4신호태인도효솔최가.
