CAJ | 학술논문

目的观察半乳凝集素-3(Galectin-3)表达与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为抗肿瘤基因治疗的方法.方法设计并化学合成Galectin-3小干扰片段并瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231(Galectin-3siRNA组),以未转染细胞为空白对照组,以转染无关siRNA为阴性对照组.荧光倒置显微镜和实时定量PCR检测干扰结果,MTT法观察干扰后24、48、72、96 h各组细胞增殖吸光度(A)值,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验和Transwell实验比较不同组间细胞迁移和侵袭情况.结果 ①转染后24 h,荧光倒置显微镜显示转染效率为(80.60±5.62)%,实时定量PCR提示Galectin-3siRNA转染后相应Galectin-3的表达明显下降(P<0.01);②干扰后24、48、72、96 h Galectin-3siRNA组细胞继续生长,但细胞生长减慢,抑制率低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05) ;③ 流式细胞术分析发现,Galectin-3siRNA组比空白对照组和阴性对照组凋亡率高(P<0.01);④ Transwell侵袭实验显示Galectin-3siRNA组穿膜细胞数少于空白对照组和阴性对照组.细胞划痕实验显示Galectin-3siRNA组细胞迁移能力明显低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01).结论 RNA干扰能抑制Galectin-3的表达以及MDA-MB-231细胞的增殖,并诱导细胞凋亡、降低其迁移侵袭能力.
목적 관찰반유응집소-3(Galectin-3)표체여종류세포증식화조망적관계,탐토이용RNA간우기술작위항종류기인치료적방법.방법 설계병화학합성Galectin-3소간우편단병순시전염유선암세포계MDA-MB-231(Galectin-3siRNA조),이미전염세포위공백대조조,이전염무관siRNA위음성대조조.형광도치현미경화실시정량PCR검측간우결과,MTT법관찰간우후24、48、72、96 h각조세포증식흡광도(A)치,류식세포의검측각조세포조망정황,화흔실험화Transwell실험비교불동조간세포천이화침습정황.결과 ①전염후24 h,형광도치현미경현시전염효솔위(80.60±5.62)%,실시정량PCR제시Galectin-3siRNA전염후상응Galectin-3적표체명현하강(P<0.01);②간우후24、48、72、96 h Galectin-3siRNA조세포계속생장,단세포생장감만,억제솔저우공백대조조화음성대조조(P＜0.05) ;③ 류식세포술분석발현,Galectin-3siRNA조비공백대조조화음성대조조조망솔고(P<0.01);④ Transwell침습실험현시Galectin-3siRNA조천막세포수소우공백대조조화음성대조조.세포화흔실험현시Galectin-3siRNA조세포천이능력명현저우공백대조조화음성대조조(P＜0.01).결론 RNA간우능억제Galectin-3적표체이급MDA-MB-231세포적증식,병유도세포조망、강저기천이침습능력.