广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
10期
1481-1485
,共5页
龙新华%刘志礼%黄山虎%毛建华%王高%周扬
龍新華%劉誌禮%黃山虎%毛建華%王高%週颺
룡신화%류지례%황산호%모건화%왕고%주양
基因沉默%VCP%骨肉瘤%增殖%迁移
基因沉默%VCP%骨肉瘤%增殖%遷移
기인침묵%VCP%골육류%증식%천이
目的 探讨沉默VCP基因对人骨肉瘤细胞系增殖、迁移的影响.方法 构建靶向VCP 基因的重组质粒载体(X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1)和阴性对照载体(Negative),测序鉴定;X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1分别转染人骨肉瘤细胞系U2-OS(阳性干扰组:X135-1-2组、X135-2-1组、X135-3-1组),Negative质粒转染为阴性对照组,未转染细胞为空白对照组.RT-PCR检测VCP mRNA的表达水平,Western blot测定VCP的蛋白表达水平,MTT检测细胞的增殖情况,Transwell migration实验检测细胞迁移力.结果 转染后48 h,与空白对照组和阴性对照组比较,X135-1-2、X135-2-1和X135-3-1组VCP mRNA和蛋白的表达均明显降低,尤以X135-3-1组更为显著[VCP mRNA和蛋白表达抑制效率分别为(81.4±3.0)%和(83.3±6.0)%];各阳性干扰组细胞的增殖能力均被明显抑制,以X135-3-1组更为显著(P<0.05);各阳性干扰组细胞的迁移能力明显下降,以X135-3-1组更为显著(P<0.05).结论 沉默VCP能有效抑制人骨肉瘤细胞系U2-OS细胞的增殖和迁移,VCP可能是骨肉瘤治疗的分子靶点.
目的 探討沉默VCP基因對人骨肉瘤細胞繫增殖、遷移的影響.方法 構建靶嚮VCP 基因的重組質粒載體(X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1)和陰性對照載體(Negative),測序鑒定;X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1分彆轉染人骨肉瘤細胞繫U2-OS(暘性榦擾組:X135-1-2組、X135-2-1組、X135-3-1組),Negative質粒轉染為陰性對照組,未轉染細胞為空白對照組.RT-PCR檢測VCP mRNA的錶達水平,Western blot測定VCP的蛋白錶達水平,MTT檢測細胞的增殖情況,Transwell migration實驗檢測細胞遷移力.結果 轉染後48 h,與空白對照組和陰性對照組比較,X135-1-2、X135-2-1和X135-3-1組VCP mRNA和蛋白的錶達均明顯降低,尤以X135-3-1組更為顯著[VCP mRNA和蛋白錶達抑製效率分彆為(81.4±3.0)%和(83.3±6.0)%];各暘性榦擾組細胞的增殖能力均被明顯抑製,以X135-3-1組更為顯著(P<0.05);各暘性榦擾組細胞的遷移能力明顯下降,以X135-3-1組更為顯著(P<0.05).結論 沉默VCP能有效抑製人骨肉瘤細胞繫U2-OS細胞的增殖和遷移,VCP可能是骨肉瘤治療的分子靶點.
목적 탐토침묵VCP기인대인골육류세포계증식、천이적영향.방법 구건파향VCP 기인적중조질립재체(X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1)화음성대조재체(Negative),측서감정;X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1분별전염인골육류세포계U2-OS(양성간우조:X135-1-2조、X135-2-1조、X135-3-1조),Negative질립전염위음성대조조,미전염세포위공백대조조.RT-PCR검측VCP mRNA적표체수평,Western blot측정VCP적단백표체수평,MTT검측세포적증식정황,Transwell migration실험검측세포천이력.결과 전염후48 h,여공백대조조화음성대조조비교,X135-1-2、X135-2-1화X135-3-1조VCP mRNA화단백적표체균명현강저,우이X135-3-1조경위현저[VCP mRNA화단백표체억제효솔분별위(81.4±3.0)%화(83.3±6.0)%];각양성간우조세포적증식능력균피명현억제,이X135-3-1조경위현저(P<0.05);각양성간우조세포적천이능력명현하강,이X135-3-1조경위현저(P<0.05).결론 침묵VCP능유효억제인골육류세포계U2-OS세포적증식화천이,VCP가능시골육류치료적분자파점.
