天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2013年
6期
520-522
,共3页
易波%李其云%饶华民%邵江华
易波%李其雲%饒華民%邵江華
역파%리기운%요화민%소강화
蛋白激酶类%结直肠肿瘤%癌%细胞凋亡%质粒%转染%重组,遗传%基因,肿瘤抑制%程序性死亡基因4%死亡相关蛋白5
蛋白激酶類%結直腸腫瘤%癌%細胞凋亡%質粒%轉染%重組,遺傳%基因,腫瘤抑製%程序性死亡基因4%死亡相關蛋白5
단백격매류%결직장종류%암%세포조망%질립%전염%중조,유전%기인,종류억제%정서성사망기인4%사망상관단백5
目的 探讨程序性死亡基因4(PDCD4)对死亡相关蛋白5(DAP5) 的表达及对人大肠癌细胞系LOVO凋亡的影响.方法 构建重组真核表达载体pFLAG/PDCD4,转染人大肠癌细胞LOVO,G418(500 mg/L)筛选获得稳定表达PDCD4的细胞系.RT-PCR及Western blotting检测LOVO细胞中PDCD4的mRNA及蛋白表达,流式细胞仪检测LOVO细胞凋亡情况,Western blotting检测LOVO细胞DAP5表达的变化.结果 成功建立稳定表达PDCD4的大肠癌细胞LOVO-pFLAG/PDCD4.转染PDCD4 的LOVO-pFLAG/PDCD4 组与空白对照LOVO 组、转染空载质粒的LOVO-pFLAG组相比,PDCD4蛋白表达和mRNA水平明显升高(P < 0.01);细胞凋亡率明显增加(P < 0.01);同时伴有DAP5蛋白表达明显升高(P < 0.01).结论 PDCD4能够诱导大肠癌细胞LOVO的凋亡,其机制可能与上调DAP5的表达有关.
目的 探討程序性死亡基因4(PDCD4)對死亡相關蛋白5(DAP5) 的錶達及對人大腸癌細胞繫LOVO凋亡的影響.方法 構建重組真覈錶達載體pFLAG/PDCD4,轉染人大腸癌細胞LOVO,G418(500 mg/L)篩選穫得穩定錶達PDCD4的細胞繫.RT-PCR及Western blotting檢測LOVO細胞中PDCD4的mRNA及蛋白錶達,流式細胞儀檢測LOVO細胞凋亡情況,Western blotting檢測LOVO細胞DAP5錶達的變化.結果 成功建立穩定錶達PDCD4的大腸癌細胞LOVO-pFLAG/PDCD4.轉染PDCD4 的LOVO-pFLAG/PDCD4 組與空白對照LOVO 組、轉染空載質粒的LOVO-pFLAG組相比,PDCD4蛋白錶達和mRNA水平明顯升高(P < 0.01);細胞凋亡率明顯增加(P < 0.01);同時伴有DAP5蛋白錶達明顯升高(P < 0.01).結論 PDCD4能夠誘導大腸癌細胞LOVO的凋亡,其機製可能與上調DAP5的錶達有關.
목적 탐토정서성사망기인4(PDCD4)대사망상관단백5(DAP5) 적표체급대인대장암세포계LOVO조망적영향.방법 구건중조진핵표체재체pFLAG/PDCD4,전염인대장암세포LOVO,G418(500 mg/L)사선획득은정표체PDCD4적세포계.RT-PCR급Western blotting검측LOVO세포중PDCD4적mRNA급단백표체,류식세포의검측LOVO세포조망정황,Western blotting검측LOVO세포DAP5표체적변화.결과 성공건립은정표체PDCD4적대장암세포LOVO-pFLAG/PDCD4.전염PDCD4 적LOVO-pFLAG/PDCD4 조여공백대조LOVO 조、전염공재질립적LOVO-pFLAG조상비,PDCD4단백표체화mRNA수평명현승고(P < 0.01);세포조망솔명현증가(P < 0.01);동시반유DAP5단백표체명현승고(P < 0.01).결론 PDCD4능구유도대장암세포LOVO적조망,기궤제가능여상조DAP5적표체유관.
