CAJ | 학술논문

为探讨β-丙内酯(β-propiolactone,BPL)灭活大鲵虹彩病毒(Giant salamander iridovirus,GSIV)的最适条件,研究了BPL对GSIV的灭活方法.采用终浓度分别为0.025％、0.05％、0.1％、0.2％的BPL灭活细胞培养的GSIV,4℃条件下分别灭活24 h、48 h、72 h、96 h,通过细菌培养、细胞培养、病毒核酸PCR扩增以及鱼体感染试验进行灭活病毒的安全性检验,确定最适灭活条件.试验结果表明,GSIV经终浓度为0.1％的BPL 4 ℃灭活处理72 h后可完全灭活病毒,灭活病毒无细菌污染,接种对GSIV敏感的鲤上皮瘤细胞系(EPC)细胞无细胞病变效应(CPE)出现,病毒主衣壳蛋白(MCP)基因特异性引物PCR反应未扩增出靶基因产物,灭活病毒对健康大鲵的感染试验未出现疾病症状.灭活效果检测结果表明,与未灭活GSIV相比较,最适灭活条件下的GSIV结构蛋白与抗原性未发生显著变化.结论显示BPL可用来灭活GSIV,本研究确立了BPL灭活GSIV的最适条件,为大鲵虹彩病毒细胞培养灭活疫苗研究奠定了重要基础.
위탐토β-병내지(β-propiolactone,BPL)멸활대예홍채병독(Giant salamander iridovirus,GSIV)적최괄조건,연구료BPL대GSIV적멸활방법.채용종농도분별위0.025％、0.05％、0.1％、0.2％적BPL멸활세포배양적GSIV,4℃조건하분별멸활24 h、48 h、72 h、96 h,통과세균배양、세포배양、병독핵산PCR확증이급어체감염시험진행멸활병독적안전성검험,학정최괄멸활조건.시험결과표명,GSIV경종농도위0.1％적BPL 4 ℃멸활처리72 h후가완전멸활병독,멸활병독무세균오염,접충대GSIV민감적리상피류세포계(EPC)세포무세포병변효응(CPE)출현,병독주의각단백(MCP)기인특이성인물PCR반응미확증출파기인산물,멸활병독대건강대예적감염시험미출현질병증상.멸활효과검측결과표명,여미멸활GSIV상비교,최괄멸활조건하적GSIV결구단백여항원성미발생현저변화.결론현시BPL가용래멸활GSIV,본연구학립료BPL멸활GSIV적최괄조건,위대예홍채병독세포배양멸활역묘연구전정료중요기출.