CAJ | 학술논문

为研究鱼类恒定链(Invariant chain,Ii)的结构与功能,应用RT-PCR和RACE(rapid amplification of cDNA ends)法,从脾脏细胞中克隆了鲢(Aristichthys molitrix)Ii基因cDNA,并进行了测序.该基因cDNA全长为1 136 bp,其中开放阅读框为699 bp,编码232个氨基酸.比对氨基酸序列发现,鲢与其他物种的li链有相同的结构域.将Ii基因cDNA片段和表达不同结构域的DNA片段分别插入真核表达质粒pEGFP-C1,转染真核细胞系COS7,发现鲢li跨膜区和胞浆区在细胞内具有定位作用.根据推测的氨基酸序列,分析不同种间Ii的同源性,表明鲢与斑马鱼(Brachydanio rerio)的同源性最高(78％),与人等哺乳动物Ii的同源性较低(30％～40％).进一步模拟构建和比较不同物种Ii链的3D结构,显示链鱼和小鼠、人和鸡的Ii链结构非常相似,甚至在一些具有重要作用的氨基酸是相同的.上述结果表明,作为重要的免疫分子,不同脊椎动物的li链不仅在遗传上具有高度同源性,而且在结构方面仍保持着高度的相似性.
위연구어류항정련(Invariant chain,Ii)적결구여공능,응용RT-PCR화RACE(rapid amplification of cDNA ends)법,종비장세포중극륭료련(Aristichthys molitrix)Ii기인cDNA,병진행료측서.해기인cDNA전장위1 136 bp,기중개방열독광위699 bp,편마232개안기산.비대안기산서렬발현,련여기타물충적li련유상동적결구역.장Ii기인cDNA편단화표체불동결구역적DNA편단분별삽입진핵표체질립pEGFP-C1,전염진핵세포계COS7,발현련li과막구화포장구재세포내구유정위작용.근거추측적안기산서렬,분석불동충간Ii적동원성,표명련여반마어(Brachydanio rerio)적동원성최고(78％),여인등포유동물Ii적동원성교저(30％～40％).진일보모의구건화비교불동물충Ii련적3D결구,현시련어화소서、인화계적Ii련결구비상상사,심지재일사구유중요작용적안기산시상동적.상술결과표명,작위중요적면역분자,불동척추동물적li련불부재유전상구유고도동원성,이차재결구방면잉보지착고도적상사성.