新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
4期
753-758
,共6页
张文智%李亚%王鹏雁%陈创夫
張文智%李亞%王鵬雁%陳創伕
장문지%리아%왕붕안%진창부
转染%效率%猪胚胎成纤维细胞%仓鼠肾细胞
轉染%效率%豬胚胎成纖維細胞%倉鼠腎細胞
전염%효솔%저배태성섬유세포%창서신세포
[目的]比较三种转染试剂对原代细胞和传代细胞的转染效率,选择合适的转染试剂.[方法]以EGFP为报告基因,分别用脂质体、磷酸钙、罗氏试剂转染PEF细胞和BHK细胞.通过改变转染试剂和质粒DNA的剂量,利用流式细胞仪分析转染效率,从而确定最佳的转染试剂.[结果]对于PEF细胞,脂质体和磷酸钙转染效果不理想,细胞死亡率高,绿色荧光表达量少.罗氏转染试剂相对较好,细胞死亡率低,并且保持原有细胞形态.对于传代细胞BHK细胞而言,各转染试剂均可达到理想转染效果.[结论]不同的细胞对转染试剂的选择也不同,传代细胞BHK用脂质体即可达到理想的效果.利用罗氏试剂可以提高转染效率,但不明显.而对于原代细胞PEF,脂质体与磷酸钙试剂的转染效率很低.相比较而言,罗氏转染试剂效果更好些,细胞毒性小,转染率在10%~12%.
[目的]比較三種轉染試劑對原代細胞和傳代細胞的轉染效率,選擇閤適的轉染試劑.[方法]以EGFP為報告基因,分彆用脂質體、燐痠鈣、囉氏試劑轉染PEF細胞和BHK細胞.通過改變轉染試劑和質粒DNA的劑量,利用流式細胞儀分析轉染效率,從而確定最佳的轉染試劑.[結果]對于PEF細胞,脂質體和燐痠鈣轉染效果不理想,細胞死亡率高,綠色熒光錶達量少.囉氏轉染試劑相對較好,細胞死亡率低,併且保持原有細胞形態.對于傳代細胞BHK細胞而言,各轉染試劑均可達到理想轉染效果.[結論]不同的細胞對轉染試劑的選擇也不同,傳代細胞BHK用脂質體即可達到理想的效果.利用囉氏試劑可以提高轉染效率,但不明顯.而對于原代細胞PEF,脂質體與燐痠鈣試劑的轉染效率很低.相比較而言,囉氏轉染試劑效果更好些,細胞毒性小,轉染率在10%~12%.
[목적]비교삼충전염시제대원대세포화전대세포적전염효솔,선택합괄적전염시제.[방법]이EGFP위보고기인,분별용지질체、린산개、라씨시제전염PEF세포화BHK세포.통과개변전염시제화질립DNA적제량,이용류식세포의분석전염효솔,종이학정최가적전염시제.[결과]대우PEF세포,지질체화린산개전염효과불이상,세포사망솔고,록색형광표체량소.라씨전염시제상대교호,세포사망솔저,병차보지원유세포형태.대우전대세포BHK세포이언,각전염시제균가체도이상전염효과.[결론]불동적세포대전염시제적선택야불동,전대세포BHK용지질체즉가체도이상적효과.이용라씨시제가이제고전염효솔,단불명현.이대우원대세포PEF,지질체여린산개시제적전염효솔흔저.상비교이언,라씨전염시제효과경호사,세포독성소,전염솔재10%~12%.