CAJ | 학술논문

[目的]为了检测RNAi沉默H11基因能否模拟H11疫苗免疫效果.[方法]针对H11基因序列设计并合成特异性dsRNA,通过浸泡方式分别将dsRNA导入捻转血矛线虫感染性L3期幼虫体内,利用实时荧光定量PCR分析H11基因在L3期幼虫中的转录抑制效果,同时,将H11-dsRNA浸泡L3期幼虫24 h后感染绵羊,定期采集绵羊粪便检查虫卵数,第30 d后剖检绵羊皱胃,检查荷虫数的变化.研究H11基因的沉默对捻转血矛线虫减虫率和减卵率的疫苗免疫效果.[结果]实时荧光定量PCR检测表明:试验组中H11基因的相对含量显著低于对照组(P＜0.01),在浸泡72 h后,H11-dsRNA组基因的表达量仅为对照组的21.33％.绵羊体内干扰沉默效果显示,试验组H11干扰组虫卵减少率为41.02％,减虫率为39.6％.[结论]研究通过浸泡法导入的dsRNA能有效抑制H11基因的转录,同时H11基因的沉默与幼虫的发育密切相关,为捻转血矛线虫及其它寄生线虫的基因功能研究提供一种新的方法.
[목적]위료검측RNAi침묵H11기인능부모의H11역묘면역효과.[방법]침대H11기인서렬설계병합성특이성dsRNA,통과침포방식분별장dsRNA도입념전혈모선충감염성L3기유충체내,이용실시형광정량PCR분석H11기인재L3기유충중적전록억제효과,동시,장H11-dsRNA침포L3기유충24 h후감염면양,정기채집면양분편검사충란수,제30 d후부검면양추위,검사하충수적변화.연구H11기인적침묵대념전혈모선충감충솔화감란솔적역묘면역효과.[결과]실시형광정량PCR검측표명:시험조중H11기인적상대함량현저저우대조조(P＜0.01),재침포72 h후,H11-dsRNA조기인적표체량부위대조조적21.33％.면양체내간우침묵효과현시,시험조H11간우조충란감소솔위41.02％,감충솔위39.6％.[결론]연구통과침포법도입적dsRNA능유효억제H11기인적전록,동시H11기인적침묵여유충적발육밀절상관,위념전혈모선충급기타기생선충적기인공능연구제공일충신적방법.