实验室研究与探索
實驗室研究與探索
실험실연구여탐색
LAABORATORY REESEARCH AND EXPLORATION
2013年
4期
52-55
,共4页
拟南芥%蛋白激酶%大肠杆菌%克隆
擬南芥%蛋白激酶%大腸桿菌%剋隆
의남개%단백격매%대장간균%극륭
介绍了以拟南芥PKS5蛋白激酶在大肠杆菌中的克隆及表达实验为蓝本,进行分子生物学实验教学模式改革.实验提取了拟南芥基因组DNA,并以此为模板用PCR法扩增出PKS5蛋白激酶基因,以pGEX-6P-1质粒为载体,构建pGEX重组质粒并将其转入大肠杆菌BL21中,筛选阳性重组子,用IPTG诱导pGEX重组子表达PKS5蛋白,最终通过SDS-PAGE检测得到约73 KDa的GST-PKS5融合蛋白.学生通过完成上述实验过程,有利于将其所学理论知识应用于实验,形成清晰完整的实验思路.
介紹瞭以擬南芥PKS5蛋白激酶在大腸桿菌中的剋隆及錶達實驗為藍本,進行分子生物學實驗教學模式改革.實驗提取瞭擬南芥基因組DNA,併以此為模闆用PCR法擴增齣PKS5蛋白激酶基因,以pGEX-6P-1質粒為載體,構建pGEX重組質粒併將其轉入大腸桿菌BL21中,篩選暘性重組子,用IPTG誘導pGEX重組子錶達PKS5蛋白,最終通過SDS-PAGE檢測得到約73 KDa的GST-PKS5融閤蛋白.學生通過完成上述實驗過程,有利于將其所學理論知識應用于實驗,形成清晰完整的實驗思路.
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