CAJ | 학술논문

目的:探讨NOD8对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞释放一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的影响.方法:pEGFP-C2及pEGFP-NOD8重组质粒分别转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,以LPS刺激RAW264.7细胞0、6、12、24h后,采用Griess reagent法测定观察细胞分泌的NO水平；ELISA法检测IL-1β和TNF-α的含量；荧光法测定活化的caspase-1水平；Western blotting检测NOD8蛋白表达及NF-κB p65亚基的核转位情况.结果:(1)与转染pEGFP-C2空质粒组比较,转染pEGFP-NOD8质粒组NOD8蛋白表达明显增加.(2)LPS刺激6、12、24h后,RAW264.7细胞释放NO、IL-1β及TNF-α均明显增加；而在pEGFP-NOD8+LPS组RAW264.7细胞,NO于12、24h的释放显著降低,IL-1β于6、12、24h的释放也明显降低,TNF-α的释放则无明显变化.(3)在LPS刺激6、12、24h后,RAW264.7细胞caspase-1活化水平均明显升高,胞浆NF-κB p65亚基表达明显减少,表明p65核转位增加；而pEGFP-NOD8+ LPS组可显著抑制caspase-1的活化以及NF-κB p65亚基的核转位,差异有统计学意义.结论:NOD8可抑制LPS诱导的巨噬细胞NO与IL-1β释放,其作用机制可能与NOD8抑制caspase-1及NF-κB的活化有关.
목적:탐토NOD8대지다당(LPS)유도거서세포석방일양화담(NO)、종류배사인자α(TNF-α)화백세포개소1β(IL-1β)적영향.방법:pEGFP-C2급pEGFP-NOD8중조질립분별전염소서거서세포RAW264.7,이LPS자격RAW264.7세포0、6、12、24h후,채용Griess reagent법측정관찰세포분비적NO수평；ELISA법검측IL-1β화TNF-α적함량；형광법측정활화적caspase-1수평；Western blotting검측NOD8단백표체급NF-κB p65아기적핵전위정황.결과:(1)여전염pEGFP-C2공질립조비교,전염pEGFP-NOD8질립조NOD8단백표체명현증가.(2)LPS자격6、12、24h후,RAW264.7세포석방NO、IL-1β급TNF-α균명현증가；이재pEGFP-NOD8+LPS조RAW264.7세포,NO우12、24h적석방현저강저,IL-1β우6、12、24h적석방야명현강저,TNF-α적석방칙무명현변화.(3)재LPS자격6、12、24h후,RAW264.7세포caspase-1활화수평균명현승고,포장NF-κB p65아기표체명현감소,표명p65핵전위증가；이pEGFP-NOD8+ LPS조가현저억제caspase-1적활화이급NF-κB p65아기적핵전위,차이유통계학의의.결론:NOD8가억제LPS유도적거서세포NO여IL-1β석방,기작용궤제가능여NOD8억제caspase-1급NF-κB적활화유관.