南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
5期
703-707
,共5页
邱娴%胡水旺%徐俊%李理%黄文杰
邱嫻%鬍水旺%徐俊%李理%黃文傑
구한%호수왕%서준%리리%황문걸
肿瘤坏死因子-α%Nox1%氧化应激%转录调控%A549细胞
腫瘤壞死因子-α%Nox1%氧化應激%轉錄調控%A549細胞
종류배사인자-α%Nox1%양화응격%전록조공%A549세포
目的 在炎症氧化应激细胞模型中筛选参与Nox1启动子活化的相关调控蛋白.方法 TNF-α激A549细胞建立炎症氧化应激细胞模型,运用DNA pull-down技术筛选出Nox1启动子区结合蛋白,再用二维凝胶电泳技术分离pull-down后的结合蛋白,然后在2D凝胶上选取与对照组表达差异大于1.5倍的蛋白质点进行切胶,最后经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,筛选出Nox1启动子区差异结合蛋白.结果 2D凝胶上共筛选出1.5倍以上差异蛋白点7个,均为表达上调蛋白,鉴定出GLE1 、DDX19A,KRT1、KRT10四种蛋白质.结论 GLE1、DDX 19A,KRT1、KRT10参与了TNF-α诱导的A549细胞Nox1活化的基因调控,为研究炎症氧化应激细胞模型的Nox1启动子区调控蛋白的生物学功能奠定了实验基础.
目的 在炎癥氧化應激細胞模型中篩選參與Nox1啟動子活化的相關調控蛋白.方法 TNF-α激A549細胞建立炎癥氧化應激細胞模型,運用DNA pull-down技術篩選齣Nox1啟動子區結閤蛋白,再用二維凝膠電泳技術分離pull-down後的結閤蛋白,然後在2D凝膠上選取與對照組錶達差異大于1.5倍的蛋白質點進行切膠,最後經基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜鑒定,篩選齣Nox1啟動子區差異結閤蛋白.結果 2D凝膠上共篩選齣1.5倍以上差異蛋白點7箇,均為錶達上調蛋白,鑒定齣GLE1 、DDX19A,KRT1、KRT10四種蛋白質.結論 GLE1、DDX 19A,KRT1、KRT10參與瞭TNF-α誘導的A549細胞Nox1活化的基因調控,為研究炎癥氧化應激細胞模型的Nox1啟動子區調控蛋白的生物學功能奠定瞭實驗基礎.
목적 재염증양화응격세포모형중사선삼여Nox1계동자활화적상관조공단백.방법 TNF-α격A549세포건립염증양화응격세포모형,운용DNA pull-down기술사선출Nox1계동자구결합단백,재용이유응효전영기술분리pull-down후적결합단백,연후재2D응효상선취여대조조표체차이대우1.5배적단백질점진행절효,최후경기질보조격광해흡전리비행시간질보감정,사선출Nox1계동자구차이결합단백.결과 2D응효상공사선출1.5배이상차이단백점7개,균위표체상조단백,감정출GLE1 、DDX19A,KRT1、KRT10사충단백질.결론 GLE1、DDX 19A,KRT1、KRT10삼여료TNF-α유도적A549세포Nox1활화적기인조공,위연구염증양화응격세포모형적Nox1계동자구조공단백적생물학공능전정료실험기출.
