南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
5期
649-653
,共5页
徐菲%齐海燕%于晓方%徐荣臻
徐菲%齊海燕%于曉方%徐榮臻
서비%제해연%우효방%서영진
钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ%结直肠癌%核转当因子κB%细胞增殖
鈣離子/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ%結直腸癌%覈轉噹因子κB%細胞增殖
개리자/개조단백의뢰성단백격매Ⅱγ%결직장암%핵전당인자κB%세포증식
目的 研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制.方法 半定量RT-PCR法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CaMKⅡγmRNA表达水平.用慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-eGFP制备慢病毒颗粒Lenti-CaMKⅡγ,转染SW620细胞,建立稳定表达CaMKⅡγ结直肠癌细胞系SW620-CaMKⅡγ.测定SW620-CaMKⅡγ细胞的生长曲线及克隆形成能力.Western blotting检测SW620-CaMKⅡγ细胞IKKα、IKKβ、IKKγ、p-IKKα/β、p-IκB和IκB表达水平.免疫荧光检测SW620-CaMKⅡγ细胞NF-κB p65核浆及核内的表达情况.检测裸鼠移植瘤的瘤体积.结果 CaMKⅡγ在5种结直肠癌细胞系中的mRNA水平均高,在20对组织中有18对癌组织mRNA水平比癌旁组织高.慢病毒转染的CaMKⅡγ过表达细胞系增殖能力增强(P＜0.05).CaMKⅡγ能够激活细胞内的NF-κB 信号通路,促进NF-κB p65进核.CaMKⅡγ过表达细胞的裸鼠移植瘤瘤体积大于阴性对照(P＜0.05).结论 CaMKⅡγ体内外均能促进结直肠癌细胞的增殖,并激活NF-κB通路.
目的 研究鈣離子/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)體內外促進結直腸癌細胞增殖的作用併探討其機製.方法 半定量RT-PCR法測定5種結直腸癌細胞繫及20對結直腸癌組織及其配對癌徬組織中CaMKⅡγmRNA錶達水平.用慢病毒載體pLenti6.3-MCS-IRES2-eGFP製備慢病毒顆粒Lenti-CaMKⅡγ,轉染SW620細胞,建立穩定錶達CaMKⅡγ結直腸癌細胞繫SW620-CaMKⅡγ.測定SW620-CaMKⅡγ細胞的生長麯線及剋隆形成能力.Western blotting檢測SW620-CaMKⅡγ細胞IKKα、IKKβ、IKKγ、p-IKKα/β、p-IκB和IκB錶達水平.免疫熒光檢測SW620-CaMKⅡγ細胞NF-κB p65覈漿及覈內的錶達情況.檢測裸鼠移植瘤的瘤體積.結果 CaMKⅡγ在5種結直腸癌細胞繫中的mRNA水平均高,在20對組織中有18對癌組織mRNA水平比癌徬組織高.慢病毒轉染的CaMKⅡγ過錶達細胞繫增殖能力增彊(P＜0.05).CaMKⅡγ能夠激活細胞內的NF-κB 信號通路,促進NF-κB p65進覈.CaMKⅡγ過錶達細胞的裸鼠移植瘤瘤體積大于陰性對照(P＜0.05).結論 CaMKⅡγ體內外均能促進結直腸癌細胞的增殖,併激活NF-κB通路.
목적 연구개리자/개조단백의뢰성단백격매Ⅱγ(CaMKⅡγ)체내외촉진결직장암세포증식적작용병탐토기궤제.방법 반정량RT-PCR법측정5충결직장암세포계급20대결직장암조직급기배대암방조직중CaMKⅡγmRNA표체수평.용만병독재체pLenti6.3-MCS-IRES2-eGFP제비만병독과립Lenti-CaMKⅡγ,전염SW620세포,건립은정표체CaMKⅡγ결직장암세포계SW620-CaMKⅡγ.측정SW620-CaMKⅡγ세포적생장곡선급극륭형성능력.Western blotting검측SW620-CaMKⅡγ세포IKKα、IKKβ、IKKγ、p-IKKα/β、p-IκB화IκB표체수평.면역형광검측SW620-CaMKⅡγ세포NF-κB p65핵장급핵내적표체정황.검측라서이식류적류체적.결과 CaMKⅡγ재5충결직장암세포계중적mRNA수평균고,재20대조직중유18대암조직mRNA수평비암방조직고.만병독전염적CaMKⅡγ과표체세포계증식능력증강(P＜0.05).CaMKⅡγ능구격활세포내적NF-κB 신호통로,촉진NF-κB p65진핵.CaMKⅡγ과표체세포적라서이식류류체적대우음성대조(P＜0.05).결론 CaMKⅡγ체내외균능촉진결직장암세포적증식,병격활NF-κB통로.
