中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2013年
2期
88-92
,共5页
邹文焘%刘广鹏%孙剑%崔磊
鄒文燾%劉廣鵬%孫劍%崔磊
추문도%류엄붕%손검%최뢰
血清白蛋白,牛%酶联免疫吸附测定%组织工程骨%残余量
血清白蛋白,牛%酶聯免疫吸附測定%組織工程骨%殘餘量
혈청백단백,우%매련면역흡부측정%조직공정골%잔여량
Serum albumin,bovine%Enzyme-linked immenosorbent assay%Tissue engineered bone%Residual
目的 检测常规体外构建的组织工程骨中牛血清白蛋白残余量,并探讨减少其残留量的方法.方法 体外分离培养人骨髓基质干细胞,取第2代细胞(P2)接种于完全脱钙骨支架材料并成骨诱导培养2周,体外构建组织工程骨.成骨诱导液为含10％胎牛血清的条件培养液,并于检测前1天更换为无血清的条件培养液.待测组织工程骨先经1∶100 (v∶v)生理盐水浸洗3次,然后加入磷酸盐缓冲液(PBS),37℃振荡浸提24 h,获取浸提液.同法获取未接种细胞的单纯支架材料的浸提液作为对照组.采用酶联免疫法检测样品浸提液中牛血清白蛋白的残余量,比较两者牛血清白蛋白残余量的差异.结果 经生理盐水洗涤3次后,洗涤液中的牛血清白蛋白含量明显降低.酶联免疫法测定的组织工程骨与单纯支架材料的牛血清白蛋白残余量分别为(15.57±5.82)ng和(14.85±5.06)ng,单位重量的牛血清白蛋白残余量分别为(0.254±0.088)ng/mg和(0.306±0.079)ng/mg,两组相比均无显著性差异(P＞ 0.05,n=10).结论 酶联免疫法适用于组织工程骨中牛血清白蛋白残余量的检测.因为支架材料较细胞更易吸附牛血清白蛋白,现有条件下构建的组织工程骨牛血清白蛋白残余量仍然较高,需要继续探索降低其残余含量的新方法.
目的 檢測常規體外構建的組織工程骨中牛血清白蛋白殘餘量,併探討減少其殘留量的方法.方法 體外分離培養人骨髓基質榦細胞,取第2代細胞(P2)接種于完全脫鈣骨支架材料併成骨誘導培養2週,體外構建組織工程骨.成骨誘導液為含10％胎牛血清的條件培養液,併于檢測前1天更換為無血清的條件培養液.待測組織工程骨先經1∶100 (v∶v)生理鹽水浸洗3次,然後加入燐痠鹽緩遲液(PBS),37℃振盪浸提24 h,穫取浸提液.同法穫取未接種細胞的單純支架材料的浸提液作為對照組.採用酶聯免疫法檢測樣品浸提液中牛血清白蛋白的殘餘量,比較兩者牛血清白蛋白殘餘量的差異.結果 經生理鹽水洗滌3次後,洗滌液中的牛血清白蛋白含量明顯降低.酶聯免疫法測定的組織工程骨與單純支架材料的牛血清白蛋白殘餘量分彆為(15.57±5.82)ng和(14.85±5.06)ng,單位重量的牛血清白蛋白殘餘量分彆為(0.254±0.088)ng/mg和(0.306±0.079)ng/mg,兩組相比均無顯著性差異(P＞ 0.05,n=10).結論 酶聯免疫法適用于組織工程骨中牛血清白蛋白殘餘量的檢測.因為支架材料較細胞更易吸附牛血清白蛋白,現有條件下構建的組織工程骨牛血清白蛋白殘餘量仍然較高,需要繼續探索降低其殘餘含量的新方法.
목적 검측상규체외구건적조직공정골중우혈청백단백잔여량,병탐토감소기잔류량적방법.방법 체외분리배양인골수기질간세포,취제2대세포(P2)접충우완전탈개골지가재료병성골유도배양2주,체외구건조직공정골.성골유도액위함10％태우혈청적조건배양액,병우검측전1천경환위무혈청적조건배양액.대측조직공정골선경1∶100 (v∶v)생리염수침세3차,연후가입린산염완충액(PBS),37℃진탕침제24 h,획취침제액.동법획취미접충세포적단순지가재료적침제액작위대조조.채용매련면역법검측양품침제액중우혈청백단백적잔여량,비교량자우혈청백단백잔여량적차이.결과 경생리염수세조3차후,세조액중적우혈청백단백함량명현강저.매련면역법측정적조직공정골여단순지가재료적우혈청백단백잔여량분별위(15.57±5.82)ng화(14.85±5.06)ng,단위중량적우혈청백단백잔여량분별위(0.254±0.088)ng/mg화(0.306±0.079)ng/mg,량조상비균무현저성차이(P＞ 0.05,n=10).결론 매련면역법괄용우조직공정골중우혈청백단백잔여량적검측.인위지가재료교세포경역흡부우혈청백단백,현유조건하구건적조직공정골우혈청백단백잔여량잉연교고,수요계속탐색강저기잔여함량적신방법.
