华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
3期
112-117
,共6页
余少梅%艾晓辉%甘金华%刘永涛%索纹纹
餘少梅%艾曉輝%甘金華%劉永濤%索紋紋
여소매%애효휘%감금화%류영도%색문문
强力霉素(DC)%杂交瘤细胞%单克隆抗体%间接竞争酶联免疫吸附法(ciELISA)%水产品%残留检测
彊力黴素(DC)%雜交瘤細胞%單剋隆抗體%間接競爭酶聯免疫吸附法(ciELISA)%水產品%殘留檢測
강력매소(DC)%잡교류세포%단극륭항체%간접경쟁매련면역흡부법(ciELISA)%수산품%잔류검측
以人工合成的强力霉素-牛血清白蛋白(DC-BSA)为抗原免疫BALB/C小鼠,用间接ELISA和间接竞争ELISA法选择细胞融合的备用小鼠;应用杂交瘤技术建立分泌DCMcAb的杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备DCMcAb,并对DCMcAb的免疫学特性进行鉴定;应用DCMcAb建立检测DC的ciELISA方法,并对其相关特性进行检测.结果表明:筛选后获得1株分泌特异性抗体的细胞3D1-H4,细胞培养上清效价为1∶(8×102),腹水效价为1∶(5.12×105),抗体为IgG1型免疫球蛋白,与四环素、土霉素和金霉素分别有8.87%、5.86%和2.74%的交叉反应率,与其他抑制物无交叉反应性;ciELISA检测方法的线性范围为1.58~199.53ng/mL,灵敏度为2.88 ng/mL,半数抑制的质量浓度IC50为36.31 ng/mL,斑点叉尾(鲴)肌肉和肝脏样品中DC的平均添加回收率分别为85.13%和79.69%,平均批间和批内变异系数均小于15%,不同基质对检测结果影响小.所建立的ciELISA方法可以应用于水产品中DC残留的检测.
以人工閤成的彊力黴素-牛血清白蛋白(DC-BSA)為抗原免疫BALB/C小鼠,用間接ELISA和間接競爭ELISA法選擇細胞融閤的備用小鼠;應用雜交瘤技術建立分泌DCMcAb的雜交瘤細胞株,用體內誘生法製備DCMcAb,併對DCMcAb的免疫學特性進行鑒定;應用DCMcAb建立檢測DC的ciELISA方法,併對其相關特性進行檢測.結果錶明:篩選後穫得1株分泌特異性抗體的細胞3D1-H4,細胞培養上清效價為1∶(8×102),腹水效價為1∶(5.12×105),抗體為IgG1型免疫毬蛋白,與四環素、土黴素和金黴素分彆有8.87%、5.86%和2.74%的交扠反應率,與其他抑製物無交扠反應性;ciELISA檢測方法的線性範圍為1.58~199.53ng/mL,靈敏度為2.88 ng/mL,半數抑製的質量濃度IC50為36.31 ng/mL,斑點扠尾(鲴)肌肉和肝髒樣品中DC的平均添加迴收率分彆為85.13%和79.69%,平均批間和批內變異繫數均小于15%,不同基質對檢測結果影響小.所建立的ciELISA方法可以應用于水產品中DC殘留的檢測.
이인공합성적강력매소-우혈청백단백(DC-BSA)위항원면역BALB/C소서,용간접ELISA화간접경쟁ELISA법선택세포융합적비용소서;응용잡교류기술건립분비DCMcAb적잡교류세포주,용체내유생법제비DCMcAb,병대DCMcAb적면역학특성진행감정;응용DCMcAb건립검측DC적ciELISA방법,병대기상관특성진행검측.결과표명:사선후획득1주분비특이성항체적세포3D1-H4,세포배양상청효개위1∶(8×102),복수효개위1∶(5.12×105),항체위IgG1형면역구단백,여사배소、토매소화금매소분별유8.87%、5.86%화2.74%적교차반응솔,여기타억제물무교차반응성;ciELISA검측방법적선성범위위1.58~199.53ng/mL,령민도위2.88 ng/mL,반수억제적질량농도IC50위36.31 ng/mL,반점차미(고)기육화간장양품중DC적평균첨가회수솔분별위85.13%화79.69%,평균비간화비내변이계수균소우15%,불동기질대검측결과영향소.소건립적ciELISA방법가이응용우수산품중DC잔류적검측.