CAJ | 학술논문

H9N2亚型禽流感病毒（Avian influenza virus, AIV）是我国主要流行的低致病性禽流感病毒亚型，因而对其进行病毒的监测与诊断显得极其重要。通过比对GenBank上H9亚型禽流感病毒HA基因序列,设计了一个特异性针对H9 AIV HA的探针。特异性和扩增曲线实验结果显示，该探针具有较好的扩增效率，且仅特异性识别H9亚型AIV。通过重组质粒pMD19-T-H9HA 10倍梯度稀释液为模板，进行荧光定量PCR。实验结果表明，本研究所建立的荧光定量PCR方法敏感性能达到100个DNA拷贝数，比传统PCR方法检测敏感性提高了1000倍。此外，本方法还能检测到10EID50个病毒，比传统PCR方法检测敏感性也提高了1000倍。通过批间和批内试验，结果表明，这两个试验的变异系数分别小于5%和1%，说明本研究的方法具有较好的重复性。此外，通过检测人工感染动物咽拭子，结果表明H9亚型AIV荧光定量PCR方法比传统PCR的方法检测敏感性提高了100倍。在临床样品的检测中，H9亚型AIV荧光定量PCR方法检测的阳性率比传统PCR法检测的阳性率提高了大约30%。综上所述，本研究所建立的H9N2亚型禽流感病毒荧光定量PCR方法具有较高的特异性、准确性和敏感性，对H9亚型禽流感疫情防控及其流行病学调查具有积极的科学意义。
H9N2아형금류감병독（Avian influenza virus, AIV）시아국주요류행적저치병성금류감병독아형，인이대기진행병독적감측여진단현득겁기중요。통과비대GenBank상H9아형금류감병독HA기인서렬,설계료일개특이성침대H9 AIV HA적탐침。특이성화확증곡선실험결과현시，해탐침구유교호적확증효솔，차부특이성식별H9아형AIV。통과중조질립pMD19-T-H9HA 10배제도희석액위모판，진행형광정량PCR。실험결과표명，본연구소건립적형광정량PCR방법민감성능체도100개DNA고패수，비전통PCR방법검측민감성제고료1000배。차외，본방법환능검측도10EID50개병독，비전통PCR방법검측민감성야제고료1000배。통과비간화비내시험，결과표명，저량개시험적변이계수분별소우5%화1%，설명본연구적방법구유교호적중복성。차외，통과검측인공감염동물인식자，결과표명H9아형AIV형광정량PCR방법비전통PCR적방법검측민감성제고료100배。재림상양품적검측중，H9아형AIV형광정량PCR방법검측적양성솔비전통PCR법검측적양성솔제고료대약30%。종상소술，본연구소건립적H9N2아형금류감병독형광정량PCR방법구유교고적특이성、준학성화민감성，대H9아형금류감역정방공급기류행병학조사구유적겁적과학의의。