中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2013年
3期
91-97
,共7页
薛计雄%张锐%张桦%孙国清%孟志刚%周焘%郭三堆
薛計雄%張銳%張樺%孫國清%孟誌剛%週燾%郭三堆
설계웅%장예%장화%손국청%맹지강%주도%곽삼퇴
双价载体%高效%抗虫性%表达分析
雙價載體%高效%抗蟲性%錶達分析
쌍개재체%고효%항충성%표체분석
bivalent vector%high-performance%insect resistant%expression analysis
以已有的中间载体和表达载体为基础,对 Bt、cpti 基因进行了修饰。在 cpti 基因的5′端增加了大豆胰蛋白酶抑制剂 SKTI 信号肽序列,在3′端增加了内质网滞留信号肽 KDEL 序列,然后在 Bt 基因的5′端增加了叶绿体靶向肽序列,构建了带有信号肽的双价表达载体 PGBIC ( K). B.4A 和不含信号肽的对照载体PGBIC. B.4A。通过农杆菌介导的喷花法转化陆地棉 Y18,Southern 杂交结果显示,外源基因已经整合到了受体植物基因组中；ELISA 结果显示,所获得的5株阳性株蛋白表达量分别提高了1~8倍不等。在杀虫实验中,修饰的双价载体的转基因植株1/4-1由于蛋白表达量的积累而显示了较高的棉铃虫抗性。为获得更高抗性的双价转基因抗虫棉提供了一种新的方法,并为基因工程中提高外源蛋白积累量的研究。
以已有的中間載體和錶達載體為基礎,對 Bt、cpti 基因進行瞭脩飾。在 cpti 基因的5′耑增加瞭大豆胰蛋白酶抑製劑 SKTI 信號肽序列,在3′耑增加瞭內質網滯留信號肽 KDEL 序列,然後在 Bt 基因的5′耑增加瞭葉綠體靶嚮肽序列,構建瞭帶有信號肽的雙價錶達載體 PGBIC ( K). B.4A 和不含信號肽的對照載體PGBIC. B.4A。通過農桿菌介導的噴花法轉化陸地棉 Y18,Southern 雜交結果顯示,外源基因已經整閤到瞭受體植物基因組中；ELISA 結果顯示,所穫得的5株暘性株蛋白錶達量分彆提高瞭1~8倍不等。在殺蟲實驗中,脩飾的雙價載體的轉基因植株1/4-1由于蛋白錶達量的積纍而顯示瞭較高的棉鈴蟲抗性。為穫得更高抗性的雙價轉基因抗蟲棉提供瞭一種新的方法,併為基因工程中提高外源蛋白積纍量的研究。
이이유적중간재체화표체재체위기출,대 Bt、cpti 기인진행료수식。재 cpti 기인적5′단증가료대두이단백매억제제 SKTI 신호태서렬,재3′단증가료내질망체류신호태 KDEL 서렬,연후재 Bt 기인적5′단증가료협록체파향태서렬,구건료대유신호태적쌍개표체재체 PGBIC ( K). B.4A 화불함신호태적대조재체PGBIC. B.4A。통과농간균개도적분화법전화륙지면 Y18,Southern 잡교결과현시,외원기인이경정합도료수체식물기인조중；ELISA 결과현시,소획득적5주양성주단백표체량분별제고료1~8배불등。재살충실험중,수식적쌍개재체적전기인식주1/4-1유우단백표체량적적루이현시료교고적면령충항성。위획득경고항성적쌍개전기인항충면제공료일충신적방법,병위기인공정중제고외원단백적루량적연구。
10.3969/j.issn.1008-0864.2013.03.13
