生物技术进展
生物技術進展
생물기술진전
2013年
3期
211-217
,共7页
周利伟%张艳丽%左冬阳%张伟%张宇宏
週利偉%張豔麗%左鼕暘%張偉%張宇宏
주리위%장염려%좌동양%장위%장우굉
过氧化氢酶%阴沟肠杆菌%毕赤酵母%基因表达%葡萄糖氧化酶
過氧化氫酶%陰溝腸桿菌%畢赤酵母%基因錶達%葡萄糖氧化酶
과양화경매%음구장간균%필적효모%기인표체%포도당양화매
catalase%Enterobacter cloacae%Pichia pastoris%gene expression%glucose oxidase
过氧化氢酶又称触酶,在食品、纺织和造纸等领域应用广泛。本研究从阴沟肠杆菌 Enterobacter cloacae XTL13中克隆得到一个过氧化氢酶基因 cat1,该基因全长2250 bp,编码749个氨基酸和一个终止密码子。将 cat1基因连接pPIC9载体并转化毕赤酵母 GS115,得到高效表达 CAT1的重组酵母菌株。在摇床水平过氧化氢酶活性可达300 U/ mL。重组 CAT1最适温度为37℃,最适 pH 为6.5,比活力为1667 U/ mg；50℃处理2 h 或 pH 5~8处理1 h 后,仍然能保留80%以上的酶活力。当 CAT1与葡萄糖氧化酶(GOD)联合使用(酶活力比例为1∶30)时,能够解除过氧化氢对 GOD 活力的抑制,使得 GOD 能够更好地发挥其作用。另外,本研究还建立了一种快速筛选过氧化氢酶重组菌株的方法。
過氧化氫酶又稱觸酶,在食品、紡織和造紙等領域應用廣汎。本研究從陰溝腸桿菌 Enterobacter cloacae XTL13中剋隆得到一箇過氧化氫酶基因 cat1,該基因全長2250 bp,編碼749箇氨基痠和一箇終止密碼子。將 cat1基因連接pPIC9載體併轉化畢赤酵母 GS115,得到高效錶達 CAT1的重組酵母菌株。在搖床水平過氧化氫酶活性可達300 U/ mL。重組 CAT1最適溫度為37℃,最適 pH 為6.5,比活力為1667 U/ mg；50℃處理2 h 或 pH 5~8處理1 h 後,仍然能保留80%以上的酶活力。噹 CAT1與葡萄糖氧化酶(GOD)聯閤使用(酶活力比例為1∶30)時,能夠解除過氧化氫對 GOD 活力的抑製,使得 GOD 能夠更好地髮揮其作用。另外,本研究還建立瞭一種快速篩選過氧化氫酶重組菌株的方法。
과양화경매우칭촉매,재식품、방직화조지등영역응용엄범。본연구종음구장간균 Enterobacter cloacae XTL13중극륭득도일개과양화경매기인 cat1,해기인전장2250 bp,편마749개안기산화일개종지밀마자。장 cat1기인련접pPIC9재체병전화필적효모 GS115,득도고효표체 CAT1적중조효모균주。재요상수평과양화경매활성가체300 U/ mL。중조 CAT1최괄온도위37℃,최괄 pH 위6.5,비활력위1667 U/ mg；50℃처리2 h 혹 pH 5~8처리1 h 후,잉연능보류80%이상적매활력。당 CAT1여포도당양화매(GOD)연합사용(매활력비례위1∶30)시,능구해제과양화경대 GOD 활력적억제,사득 GOD 능구경호지발휘기작용。령외,본연구환건립료일충쾌속사선과양화경매중조균주적방법。
10.3969/j.issn.2095-2341.2013.03.11
