CAJ | 학술논문

为深入了解仔猪腹泻的病因,本研究在不同发病猪场采集了115份临床样品,通过RT-PCR方法对猪流行性腹泻病毒(PEDV)进行检测,结果显示总阳性率为81.7％.进一步从部分样品中对PEDV的N基因进行克隆和序列分析,结果显示采集的临床样品中各分离株之间的氨基酸同源性高达99％以上,与代表性病毒株CV777的氨基酸同源性为97.4 ％～98.1％,表明目前流行的PEDV其N基因仍然相对保守的.同时,构建了重组表达载体pGEX-N,经诱导表达显示该重组蛋白呈可溶性表达,重组蛋白大小约为81 ku,western blot分析结果表明该重组蛋白能够被PEDV阳性猪血清特异性识别.将纯化后的重组N蛋白作为包被抗原,对20份已知背景的临床猪血清抗体进行ELISA检测,结果显示有9份血清为抗体阳性,ll份血清呈抗体阴性,与应用RT-PCR方法鉴定抗原的结果符合率为85％.本研究表达的重组N蛋白具有良好的抗原性,可以将其作为PEDV血清学诊断的候选抗原.
위심입료해자저복사적병인,본연구재불동발병저장채집료115빈림상양품,통과RT-PCR방법대저류행성복사병독(PEDV)진행검측,결과현시총양성솔위81.7％.진일보종부분양품중대PEDV적N기인진행극륭화서렬분석,결과현시채집적림상양품중각분리주지간적안기산동원성고체99％이상,여대표성병독주CV777적안기산동원성위97.4 ％～98.1％,표명목전류행적PEDV기N기인잉연상대보수적.동시,구건료중조표체재체pGEX-N,경유도표체현시해중조단백정가용성표체,중조단백대소약위81 ku,western blot분석결과표명해중조단백능구피PEDV양성저혈청특이성식별.장순화후적중조N단백작위포피항원,대20빈이지배경적림상저혈청항체진행ELISA검측,결과현시유9빈혈청위항체양성,ll빈혈청정항체음성,여응용RT-PCR방법감정항원적결과부합솔위85％.본연구표체적중조N단백구유량호적항원성,가이장기작위PEDV혈청학진단적후선항원.