中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2013年
23期
4272-4278
,共7页
杜晶春%朱蕊%范婷婷%王鹏鲲%林勇平%徐霞
杜晶春%硃蕊%範婷婷%王鵬鯤%林勇平%徐霞
두정춘%주예%범정정%왕붕곤%림용평%서하
干细胞%干细胞培养与分化%人羊水间充质干细胞%肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体%基因修饰%慢病毒载体%多位点%稳定表达%目的基因%293FT细胞%组织工程%国家自然科学基金%干细胞图片文章
榦細胞%榦細胞培養與分化%人羊水間充質榦細胞%腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體%基因脩飾%慢病毒載體%多位點%穩定錶達%目的基因%293FT細胞%組織工程%國傢自然科學基金%榦細胞圖片文章
간세포%간세포배양여분화%인양수간충질간세포%종류배사인자상관조망유도배체%기인수식%만병독재체%다위점%은정표체%목적기인%293FT세포%조직공정%국가자연과학기금%간세포도편문장
@@@@背景:以间充质干细胞为载体的基因治疗新方法具有广阔的应用价值。目的:利用慢病毒感染方法将肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体导入人羊水来源的间充质干细胞,以期获得稳定表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的人羊水间充质干细胞。方法:首先利用多位点 Gateway技术构建慢病毒表达载体 pLVpuro/EF1α-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,将该表达载体与慢病毒包装质粒同时转染293FT 细胞,从而获得携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的慢病毒颗粒。利用重组慢病毒颗粒感染人羊水间充质干细胞,并通过抗生素筛选的方法获得稳定表达目的基因-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的羊水间充质干细胞,并对其稳定性进行鉴定。结果与结论:酶联免疫吸附法和Western blot检测结果表明,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白在感染的人羊水间充质干细胞内呈高表达,其表达量可达到72μg/L。说明实验成功制备了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞。
@@@@揹景:以間充質榦細胞為載體的基因治療新方法具有廣闊的應用價值。目的:利用慢病毒感染方法將腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體導入人羊水來源的間充質榦細胞,以期穫得穩定錶達腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的人羊水間充質榦細胞。方法:首先利用多位點 Gateway技術構建慢病毒錶達載體 pLVpuro/EF1α-腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體,將該錶達載體與慢病毒包裝質粒同時轉染293FT 細胞,從而穫得攜帶腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體基因的慢病毒顆粒。利用重組慢病毒顆粒感染人羊水間充質榦細胞,併通過抗生素篩選的方法穫得穩定錶達目的基因-腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的羊水間充質榦細胞,併對其穩定性進行鑒定。結果與結論:酶聯免疫吸附法和Western blot檢測結果錶明,腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體蛋白在感染的人羊水間充質榦細胞內呈高錶達,其錶達量可達到72μg/L。說明實驗成功製備瞭腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體脩飾的人羊水間充質榦細胞。
@@@@배경:이간충질간세포위재체적기인치료신방법구유엄활적응용개치。목적:이용만병독감염방법장종류배사인자상관조망유도배체도입인양수래원적간충질간세포,이기획득은정표체종류배사인자상관조망유도배체적인양수간충질간세포。방법:수선이용다위점 Gateway기술구건만병독표체재체 pLVpuro/EF1α-종류배사인자상관조망유도배체,장해표체재체여만병독포장질립동시전염293FT 세포,종이획득휴대종류배사인자상관조망유도배체기인적만병독과립。이용중조만병독과립감염인양수간충질간세포,병통과항생소사선적방법획득은정표체목적기인-종류배사인자상관조망유도배체적양수간충질간세포,병대기은정성진행감정。결과여결론:매련면역흡부법화Western blot검측결과표명,종류배사인자상관조망유도배체단백재감염적인양수간충질간세포내정고표체,기표체량가체도72μg/L。설명실험성공제비료종류배사인자상관조망유도배체수식적인양수간충질간세포。
10.3969/j.issn.2095-4344.2013.23.013