CAJ | 학술논문

@@@@背景：在地塞米松、维生素 C 和β-甘油磷酸钠的共同作用下，人脐带间充质干细胞可以向成骨细胞分化。作为糖皮质类激素的地塞米松，其浓度对人脐带间充质干细胞体外成骨分化存在着影响。目的：探寻人脐带间充质干细胞向成骨细胞诱导分化过程中地塞米松的优选浓度。方法：采用植块法从正常足月新生儿脐带中分离培养间充质干细胞。取第3代细胞进行日常细胞培养和诱导分化实验。流式细胞术检测所获细胞的表面标记表达情况，成脂、成骨诱导分化鉴定人脐带间充质干细胞。倒置相差显微镜观察成骨分化过程中细胞形态的变化。以含1×10-8 mol/L，5×10-8 mol/L，1×10-7 mol/L 3种浓度地塞米松的成骨诱导液对人脐带间充质干细胞进行成骨诱导。盐酸四环素荧光及Von Kossa染色法对比观察钙结节形成。反转录-聚合酶链反应法对比检测细胞骨桥蛋白基因表达。结果与结论：植块法分离的人脐带间充质干细胞形态均一，多为梭形，平行排列生长或旋涡状生长。流式细胞术检测CD29，CD73和CD90呈阳性表达，CD31，CD34和HLA-DR呈阴性表达。成脂诱导后可观察到细胞内有脂滴形成，油红O染色呈阳性。盐酸四环素荧光结果和Von Kossa染色结果显示，所形成的钙结节大小及数量，均随着地塞米松浓度的增加而增强、增多。反转录-聚合酶链反应检测结果显示，3种浓度地塞米松组的骨桥蛋白基因均有表达，且表达强度随着地塞米松浓度的增加而增强。提示成骨诱导液中地塞米松浓度为1×10-7 mol/L时，能更有效地诱导人脐带间充质干细胞向成骨细胞分化。
@@@@배경：재지새미송、유생소 C 화β-감유린산납적공동작용하，인제대간충질간세포가이향성골세포분화。작위당피질류격소적지새미송，기농도대인제대간충질간세포체외성골분화존재착영향。목적：탐심인제대간충질간세포향성골세포유도분화과정중지새미송적우선농도。방법：채용식괴법종정상족월신생인제대중분리배양간충질간세포。취제3대세포진행일상세포배양화유도분화실험。류식세포술검측소획세포적표면표기표체정황，성지、성골유도분화감정인제대간충질간세포。도치상차현미경관찰성골분화과정중세포형태적변화。이함1×10-8 mol/L，5×10-8 mol/L，1×10-7 mol/L 3충농도지새미송적성골유도액대인제대간충질간세포진행성골유도。염산사배소형광급Von Kossa염색법대비관찰개결절형성。반전록-취합매련반응법대비검측세포골교단백기인표체。결과여결론：식괴법분리적인제대간충질간세포형태균일，다위사형，평행배렬생장혹선와상생장。류식세포술검측CD29，CD73화CD90정양성표체，CD31，CD34화HLA-DR정음성표체。성지유도후가관찰도세포내유지적형성，유홍O염색정양성。염산사배소형광결과화Von Kossa염색결과현시，소형성적개결절대소급수량，균수착지새미송농도적증가이증강、증다。반전록-취합매련반응검측결과현시，3충농도지새미송조적골교단백기인균유표체，차표체강도수착지새미송농도적증가이증강。제시성골유도액중지새미송농도위1×10-7 mol/L시，능경유효지유도인제대간충질간세포향성골세포분화。
10.3969/j.issn.2095-4344.2013.23.004