泸州医学院学报
瀘州醫學院學報
로주의학원학보
JOURNAL OF LUZHOU MEDICAL COLLEGE
2012年
6期
587-590
,共4页
韩建红%赖国旗%赵明德%吴志邦
韓建紅%賴國旂%趙明德%吳誌邦
한건홍%뢰국기%조명덕%오지방
RNAi%HSP70基因%HeLa细胞%宫颈癌
RNAi%HSP70基因%HeLa細胞%宮頸癌
RNAi%HSP70기인%HeLa세포%궁경암
目的:本研究初步探讨RNAi技术应用于宫颈癌基因治疗的特异性及其作用机理.方法:设计靶向HSP70基因siRNA序列,构建重组表达载体pTZU6+1-siRNA-HSP70,在脂质体介导下瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,在体外诱导RNAi沉默HSP70基因,同时设转染空载体pTZU6+1为阴性对照组和不加任何试剂的空白对照组.采用RT-PCR和Western blotting方法检测实验组和对照组中HSP70表达；MTT法检测细胞生长与增殖；流式细胞术检测细胞的凋亡率和细胞周期分布.结果:与对照组相比,实验组转染HeLa细胞后,细胞的HSP70 mRNA和蛋白表达均明显下调(P＜0.01)；细胞生长抑制率增高(P＜0.05);细胞周期相分布发生变化.结论:siRNA明显抑制HSP70的表达及宫颈癌HeLa细胞的增殖,并引起细胞凋亡和细胞周期改变,为进一步研究HSP70基因在宫颈癌细胞凋亡中的作用及其机制奠定了基础.
目的:本研究初步探討RNAi技術應用于宮頸癌基因治療的特異性及其作用機理.方法:設計靶嚮HSP70基因siRNA序列,構建重組錶達載體pTZU6+1-siRNA-HSP70,在脂質體介導下瞬時轉染宮頸癌HeLa細胞,在體外誘導RNAi沉默HSP70基因,同時設轉染空載體pTZU6+1為陰性對照組和不加任何試劑的空白對照組.採用RT-PCR和Western blotting方法檢測實驗組和對照組中HSP70錶達；MTT法檢測細胞生長與增殖；流式細胞術檢測細胞的凋亡率和細胞週期分佈.結果:與對照組相比,實驗組轉染HeLa細胞後,細胞的HSP70 mRNA和蛋白錶達均明顯下調(P＜0.01)；細胞生長抑製率增高(P＜0.05);細胞週期相分佈髮生變化.結論:siRNA明顯抑製HSP70的錶達及宮頸癌HeLa細胞的增殖,併引起細胞凋亡和細胞週期改變,為進一步研究HSP70基因在宮頸癌細胞凋亡中的作用及其機製奠定瞭基礎.
목적:본연구초보탐토RNAi기술응용우궁경암기인치료적특이성급기작용궤리.방법:설계파향HSP70기인siRNA서렬,구건중조표체재체pTZU6+1-siRNA-HSP70,재지질체개도하순시전염궁경암HeLa세포,재체외유도RNAi침묵HSP70기인,동시설전염공재체pTZU6+1위음성대조조화불가임하시제적공백대조조.채용RT-PCR화Western blotting방법검측실험조화대조조중HSP70표체；MTT법검측세포생장여증식；류식세포술검측세포적조망솔화세포주기분포.결과:여대조조상비,실험조전염HeLa세포후,세포적HSP70 mRNA화단백표체균명현하조(P＜0.01)；세포생장억제솔증고(P＜0.05);세포주기상분포발생변화.결론:siRNA명현억제HSP70적표체급궁경암HeLa세포적증식,병인기세포조망화세포주기개변,위진일보연구HSP70기인재궁경암세포조망중적작용급기궤제전정료기출.
