CAJ | 학술논문

目的:研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖的影响,并对其影响肝癌细胞增殖的机制进行探讨,为STAT5A基因在肝细胞癌中的功能研究提供实验依据.方法:构建针对STAT5A基因的shRNA真核表达载体,脂质体法转染人肝癌细胞HepG2,采用半定量RT-PCR的方法检测细胞中STAT5A mRNA的变化；蛋白质印迹技术检测转染前后细胞中STAT5A蛋白、细胞周期蛋白Cyclin D1蛋白表达的变化；采用MTT法检测细胞增殖的情况.结果:酶切及测序结果显示shRNA表达载体均构建成功,转染HepG2细胞48h后,与对照组相比,RT-PCR结果显示实验组细胞中STAT5AmRNA的抑制率为72.03％ (P＜0.05),蛋白质印迹法显示STAT5A蛋白的抑制率为66.27％(P＜0.05),细胞周期蛋白Cyclin D1蛋白表达下降47.16％(P＜0.05),同时MTT法显示细胞生长速度减慢、增殖抑制明显.结论:抑制STAT5A基因的表达可有效抑制HepG2细胞的增殖,其机制可能是通过下调Cyclin D1的表达实现的.
목적:연구억제STAT5A기인적표체대인간암HepG2세포증식적영향,병대기영향간암세포증식적궤제진행탐토,위STAT5A기인재간세포암중적공능연구제공실험의거.방법:구건침대STAT5A기인적shRNA진핵표체재체,지질체법전염인간암세포HepG2,채용반정량RT-PCR적방법검측세포중STAT5A mRNA적변화；단백질인적기술검측전염전후세포중STAT5A단백、세포주기단백Cyclin D1단백표체적변화；채용MTT법검측세포증식적정황.결과:매절급측서결과현시shRNA표체재체균구건성공,전염HepG2세포48h후,여대조조상비,RT-PCR결과현시실험조세포중STAT5AmRNA적억제솔위72.03％ (P＜0.05),단백질인적법현시STAT5A단백적억제솔위66.27％(P＜0.05),세포주기단백Cyclin D1단백표체하강47.16％(P＜0.05),동시MTT법현시세포생장속도감만、증식억제명현.결론:억제STAT5A기인적표체가유효억제HepG2세포적증식,기궤제가능시통과하조Cyclin D1적표체실현적.