浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2013年
3期
498-502
,共5页
吴红%高克利%曲良谱%常永义
吳紅%高剋利%麯良譜%常永義
오홍%고극리%곡량보%상영의
葡萄%基因组DNA%RAPD优化
葡萄%基因組DNA%RAPD優化
포도%기인조DNA%RAPD우화
采用改良CTAB法提取葡萄属22种植物的基因组DNA,对其完整性进行了测定,通过单因素五水平试验,筛选模板、Mg2+、Taq酶、dNTPs和随机引物的浓度及其用量,建立了葡萄RAPD技术最优体系,即25μL体积中模板DNA为40 ng· μL-1,MgCl2 2.0 mmol·L-1,dNTP 0.8 mmol·L-1,Taq DNA聚合酶1 U·μL-1,引物0.8 μmol· L-1,建立了葡萄基因组DNA的RAPD反应扩增程序,即94℃预变性4 min,94℃循环变性45 s,37℃退火55 s,72℃延伸80 s,40个循环,最后72℃延伸10 min.
採用改良CTAB法提取葡萄屬22種植物的基因組DNA,對其完整性進行瞭測定,通過單因素五水平試驗,篩選模闆、Mg2+、Taq酶、dNTPs和隨機引物的濃度及其用量,建立瞭葡萄RAPD技術最優體繫,即25μL體積中模闆DNA為40 ng· μL-1,MgCl2 2.0 mmol·L-1,dNTP 0.8 mmol·L-1,Taq DNA聚閤酶1 U·μL-1,引物0.8 μmol· L-1,建立瞭葡萄基因組DNA的RAPD反應擴增程序,即94℃預變性4 min,94℃循環變性45 s,37℃退火55 s,72℃延伸80 s,40箇循環,最後72℃延伸10 min.
채용개량CTAB법제취포도속22충식물적기인조DNA,대기완정성진행료측정,통과단인소오수평시험,사선모판、Mg2+、Taq매、dNTPs화수궤인물적농도급기용량,건립료포도RAPD기술최우체계,즉25μL체적중모판DNA위40 ng· μL-1,MgCl2 2.0 mmol·L-1,dNTP 0.8 mmol·L-1,Taq DNA취합매1 U·μL-1,인물0.8 μmol· L-1,건립료포도기인조DNA적RAPD반응확증정서,즉94℃예변성4 min,94℃순배변성45 s,37℃퇴화55 s,72℃연신80 s,40개순배,최후72℃연신10 min.
