安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2013年
6期
590-595
,共6页
王家钰%张丽%吴萍%朱孝峰%张旭东%张林杰
王傢鈺%張麗%吳萍%硃孝峰%張旭東%張林傑
왕가옥%장려%오평%주효봉%장욱동%장림걸
胃肿瘤%内质网应激%Noxa%Mcl-1%小干扰RNA
胃腫瘤%內質網應激%Noxa%Mcl-1%小榦擾RNA
위종류%내질망응격%Noxa%Mcl-1%소간우RNA
目的 研究胃腺癌细胞对内质网应激诱导细胞凋亡耐受中BH3-only家族蛋白Noxa的表达、作用以及相关机制.方法 衣霉素(TM)处理SGC-7901中分化胃腺癌细胞株及BGC-823低分化胃腺癌细胞株;采用PI单染法测定细胞凋亡率;Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、成人T细胞白血病诱导的PMA反应蛋白(Noxa)和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)蛋白变化;小干扰RNA(siRNA)技术特异“沉默”Mcl-1和Noxa基因;实时荧光定量PCR检测Noxa mRNA水平变化.结果 TM处理胃腺癌细胞后,GRP78表达升高;胃腺癌细胞对TM诱导的内质网应激性凋亡耐受,Caspase-3和Caspase-9活化较弱;Noxa在蛋白水平和mRNA水平表达均升高;Mcl-1在蛋白水平表达升高;在SGC-7901细胞中,“沉默”Mcl-1基因会使细胞凋亡率升高,而双“沉默”Mcl-1和Noxa基因则细胞凋亡率明显下降.结论 胃腺癌SGC-7901细胞在内质网应激状态下,Noxa的促凋亡作用被同样上调的Mcl-1抗凋亡作用拮抗,是胃腺癌细胞耐受内质网应激诱导凋亡的重要机制.
目的 研究胃腺癌細胞對內質網應激誘導細胞凋亡耐受中BH3-only傢族蛋白Noxa的錶達、作用以及相關機製.方法 衣黴素(TM)處理SGC-7901中分化胃腺癌細胞株及BGC-823低分化胃腺癌細胞株;採用PI單染法測定細胞凋亡率;Western blot法檢測葡萄糖調節蛋白78(GRP78)、半胱天鼕氨痠蛋白酶3(Caspase-3)、半胱天鼕氨痠蛋白酶9(Caspase-9)、成人T細胞白血病誘導的PMA反應蛋白(Noxa)和髓樣細胞白血病-1(Mcl-1)蛋白變化;小榦擾RNA(siRNA)技術特異“沉默”Mcl-1和Noxa基因;實時熒光定量PCR檢測Noxa mRNA水平變化.結果 TM處理胃腺癌細胞後,GRP78錶達升高;胃腺癌細胞對TM誘導的內質網應激性凋亡耐受,Caspase-3和Caspase-9活化較弱;Noxa在蛋白水平和mRNA水平錶達均升高;Mcl-1在蛋白水平錶達升高;在SGC-7901細胞中,“沉默”Mcl-1基因會使細胞凋亡率升高,而雙“沉默”Mcl-1和Noxa基因則細胞凋亡率明顯下降.結論 胃腺癌SGC-7901細胞在內質網應激狀態下,Noxa的促凋亡作用被同樣上調的Mcl-1抗凋亡作用拮抗,是胃腺癌細胞耐受內質網應激誘導凋亡的重要機製.
목적 연구위선암세포대내질망응격유도세포조망내수중BH3-only가족단백Noxa적표체、작용이급상관궤제.방법 의매소(TM)처리SGC-7901중분화위선암세포주급BGC-823저분화위선암세포주;채용PI단염법측정세포조망솔;Western blot법검측포도당조절단백78(GRP78)、반광천동안산단백매3(Caspase-3)、반광천동안산단백매9(Caspase-9)、성인T세포백혈병유도적PMA반응단백(Noxa)화수양세포백혈병-1(Mcl-1)단백변화;소간우RNA(siRNA)기술특이“침묵”Mcl-1화Noxa기인;실시형광정량PCR검측Noxa mRNA수평변화.결과 TM처리위선암세포후,GRP78표체승고;위선암세포대TM유도적내질망응격성조망내수,Caspase-3화Caspase-9활화교약;Noxa재단백수평화mRNA수평표체균승고;Mcl-1재단백수평표체승고;재SGC-7901세포중,“침묵”Mcl-1기인회사세포조망솔승고,이쌍“침묵”Mcl-1화Noxa기인칙세포조망솔명현하강.결론 위선암SGC-7901세포재내질망응격상태하,Noxa적촉조망작용피동양상조적Mcl-1항조망작용길항,시위선암세포내수내질망응격유도조망적중요궤제.
