中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
7期
985-990
,共6页
徐文明%兰爱平%林建聪%郭润民%沈宁%陈培熹%冯鉴强
徐文明%蘭愛平%林建聰%郭潤民%瀋寧%陳培熹%馮鑒彊
서문명%란애평%림건총%곽윤민%침저%진배희%풍감강
ERK1/2%活性氧%氯化钴%凋亡%线粒体膜电位%p38MAPK
ERK1/2%活性氧%氯化鈷%凋亡%線粒體膜電位%p38MAPK
ERK1/2%활성양%록화고%조망%선립체막전위%p38MAPK
目的 探讨胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在化学性缺氧损伤PC12细胞中的作用.方法 应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞建立化学性缺氧损伤模型.应用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)比色法检测细胞存活率;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照像检测线粒体膜电位(MMP);流式细胞术检测凋亡细胞百分比;Western blot法测定caspase-3、ERK1/2和p38MAPK蛋白的表达水平.结果 应用600 μmol·L-1 处理PC12细胞60 min可使磷酸化(p)ERK1/2的表达明显升高;在600 μmol·L-1 CoCl2处理PC12细胞前,应用500 μmol·L-1N-乙酰半胱氨酸(NAC,为活性氧的清除剂)预处理1 h可抑制CoCl2对p-ERK1/2表达的上调作用;在600 μmol·L-1 CoCl2处理PC12细胞前,应用10 μmol·L-1U0126(ERK1/2抑制剂)预处理2 h可保护PC12细胞对抗CoCl2引起的损伤,使细胞存活率升高,凋亡细胞数目和cleaved caspase-3表达及线粒体膜电位(MMP)丢失均减少;10 μmol·L-1U0126预处理还能抑制CoCl2对p-p38MAPK表达的上调作用.此外,应用20 μmol·L-1 SB203580(p38MAPK抑制剂)预处理能抑制CoCl2对p-ERK1/2表达的上调作用.结论 活性氧激活的ERK1/2通路介导CoCl2对PC12细胞的损伤作用,并与p38MAPK通路存在相互的的激活作用.
目的 探討胞外信號調節激酶1/2(ERK1/2)在化學性缺氧損傷PC12細胞中的作用.方法 應用化學性低氧模擬劑氯化鈷(CoCl2)處理PC12細胞建立化學性缺氧損傷模型.應用細胞計數試劑盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)比色法檢測細胞存活率;囉丹明123(Rh123)染色熒光顯微鏡照像檢測線粒體膜電位(MMP);流式細胞術檢測凋亡細胞百分比;Western blot法測定caspase-3、ERK1/2和p38MAPK蛋白的錶達水平.結果 應用600 μmol·L-1 處理PC12細胞60 min可使燐痠化(p)ERK1/2的錶達明顯升高;在600 μmol·L-1 CoCl2處理PC12細胞前,應用500 μmol·L-1N-乙酰半胱氨痠(NAC,為活性氧的清除劑)預處理1 h可抑製CoCl2對p-ERK1/2錶達的上調作用;在600 μmol·L-1 CoCl2處理PC12細胞前,應用10 μmol·L-1U0126(ERK1/2抑製劑)預處理2 h可保護PC12細胞對抗CoCl2引起的損傷,使細胞存活率升高,凋亡細胞數目和cleaved caspase-3錶達及線粒體膜電位(MMP)丟失均減少;10 μmol·L-1U0126預處理還能抑製CoCl2對p-p38MAPK錶達的上調作用.此外,應用20 μmol·L-1 SB203580(p38MAPK抑製劑)預處理能抑製CoCl2對p-ERK1/2錶達的上調作用.結論 活性氧激活的ERK1/2通路介導CoCl2對PC12細胞的損傷作用,併與p38MAPK通路存在相互的的激活作用.
목적 탐토포외신호조절격매1/2(ERK1/2)재화학성결양손상PC12세포중적작용.방법 응용화학성저양모의제록화고(CoCl2)처리PC12세포건립화학성결양손상모형.응용세포계수시제합-8(cell counting kit-8,CCK-8)비색법검측세포존활솔;라단명123(Rh123)염색형광현미경조상검측선립체막전위(MMP);류식세포술검측조망세포백분비;Western blot법측정caspase-3、ERK1/2화p38MAPK단백적표체수평.결과 응용600 μmol·L-1 처리PC12세포60 min가사린산화(p)ERK1/2적표체명현승고;재600 μmol·L-1 CoCl2처리PC12세포전,응용500 μmol·L-1N-을선반광안산(NAC,위활성양적청제제)예처리1 h가억제CoCl2대p-ERK1/2표체적상조작용;재600 μmol·L-1 CoCl2처리PC12세포전,응용10 μmol·L-1U0126(ERK1/2억제제)예처리2 h가보호PC12세포대항CoCl2인기적손상,사세포존활솔승고,조망세포수목화cleaved caspase-3표체급선립체막전위(MMP)주실균감소;10 μmol·L-1U0126예처리환능억제CoCl2대p-p38MAPK표체적상조작용.차외,응용20 μmol·L-1 SB203580(p38MAPK억제제)예처리능억제CoCl2대p-ERK1/2표체적상조작용.결론 활성양격활적ERK1/2통로개도CoCl2대PC12세포적손상작용,병여p38MAPK통로존재상호적적격활작용.
