中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
7期
966-970
,共5页
郭晓宇%李唯%陈克明%周建%杨柯%鲁金星%郝海婷%高玉海
郭曉宇%李唯%陳剋明%週建%楊柯%魯金星%郝海婷%高玉海
곽효우%리유%진극명%주건%양가%로금성%학해정%고옥해
骨髓基质细胞%淫羊藿苷%NOS%AKT%阻断剂%信号通路
骨髓基質細胞%淫羊藿苷%NOS%AKT%阻斷劑%信號通路
골수기질세포%음양곽감%NOS%AKT%조단제%신호통로
目的 研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)促进体外培养大鼠骨髓基质细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs)成骨性分化的信号传导机制.方法 贴壁分离法培养rBMSCs,传至第2代后用流式法鉴定细胞纯度并用于机制研究.细胞铺满皿底后分为ICA组(1×10-5 mol·L-1)、LY294002组(5×10-5 mol·L-1)、ICA+LY294002组和空白对照组.不同处理24 h后分别用Real-time PCR法检测ALP、eNOS和iNOS 的基因表达水平,用Western blot法检测p-AKT、eNOS和iNOS蛋白表达量,同时测定TNOS、iNOS活性和NO生成量.结果 基因表达和蛋白质检测结果均显示,10-5 mol·L-1 ICA明显提高rBMSCs的ALP表达水平(P<0.01),PI3K的特异性阻断剂LY294002可抑制ICA对ALP的提高作用,亦明显降低p-AKT的表达水平.ICA可提高rBMSCs的eNOS和iNOS表达水平,但LY294002只能抑制eNOS的增加,对iNOS无影响.TNOS和NO与eNOS和ALP的变化趋势一致,iNOS活性不受LY294002的影响.结论 ICA通过PI3K/AKT-eNOS途径促进rBMSCs的成骨性分化.
目的 研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)促進體外培養大鼠骨髓基質細胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs)成骨性分化的信號傳導機製.方法 貼壁分離法培養rBMSCs,傳至第2代後用流式法鑒定細胞純度併用于機製研究.細胞鋪滿皿底後分為ICA組(1×10-5 mol·L-1)、LY294002組(5×10-5 mol·L-1)、ICA+LY294002組和空白對照組.不同處理24 h後分彆用Real-time PCR法檢測ALP、eNOS和iNOS 的基因錶達水平,用Western blot法檢測p-AKT、eNOS和iNOS蛋白錶達量,同時測定TNOS、iNOS活性和NO生成量.結果 基因錶達和蛋白質檢測結果均顯示,10-5 mol·L-1 ICA明顯提高rBMSCs的ALP錶達水平(P<0.01),PI3K的特異性阻斷劑LY294002可抑製ICA對ALP的提高作用,亦明顯降低p-AKT的錶達水平.ICA可提高rBMSCs的eNOS和iNOS錶達水平,但LY294002隻能抑製eNOS的增加,對iNOS無影響.TNOS和NO與eNOS和ALP的變化趨勢一緻,iNOS活性不受LY294002的影響.結論 ICA通過PI3K/AKT-eNOS途徑促進rBMSCs的成骨性分化.
목적 연구음양곽감(Icariin,ICA)촉진체외배양대서골수기질세포(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs)성골성분화적신호전도궤제.방법 첩벽분리법배양rBMSCs,전지제2대후용류식법감정세포순도병용우궤제연구.세포포만명저후분위ICA조(1×10-5 mol·L-1)、LY294002조(5×10-5 mol·L-1)、ICA+LY294002조화공백대조조.불동처리24 h후분별용Real-time PCR법검측ALP、eNOS화iNOS 적기인표체수평,용Western blot법검측p-AKT、eNOS화iNOS단백표체량,동시측정TNOS、iNOS활성화NO생성량.결과 기인표체화단백질검측결과균현시,10-5 mol·L-1 ICA명현제고rBMSCs적ALP표체수평(P<0.01),PI3K적특이성조단제LY294002가억제ICA대ALP적제고작용,역명현강저p-AKT적표체수평.ICA가제고rBMSCs적eNOS화iNOS표체수평,단LY294002지능억제eNOS적증가,대iNOS무영향.TNOS화NO여eNOS화ALP적변화추세일치,iNOS활성불수LY294002적영향.결론 ICA통과PI3K/AKT-eNOS도경촉진rBMSCs적성골성분화.
