猪源嗜性衣原体HB1043株主要外膜蛋白(MOMP)基因的分析及重组表达
저원기성의원체HB1043주주요외막단백(MOMP)기인적분석급중조표체
Cloning and Expression of Major Outer Membrane Protein of Chlamydophila Clinical Strain HB1043 from Swine
  • 万方数据
    湖北农业科学 호북농업과학

    2013年 4期 949-952 ,共4页

    闫少侠%田永祥%刘泽文%袁芳艳%郭锐%段正赢%杨克礼%孟丽%周丹娜

    염소협%전영상%류택문%원방염%곽예%단정영%양극례%맹려%주단나

    猪流产嗜性衣原体%主要外膜蛋白(MOMP)%重组表达 豬流產嗜性衣原體%主要外膜蛋白(MOMP)%重組錶達
    저유산기성의원체%주요외막단백(MOMP)%중조표체
    Chlamydophila%major outer membrane protein%recombined expression
    根据GenBank中衣原体主要外膜蛋白(MOMP)全基因序列设计特异性引物,以临床分离的衣原体病原中提取的衣原体全基因组为模板,利用特异性引物PCR扩增得到MOMP全基因序列.通过BLAST比对,结果显示其与已提交的猪流产衣原体CG1株的MOMP序列(EU531729)有1个碱基不同.根据对测序结果进行信号肽序列预测及内切酶位点分析,选用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切将目的蛋白序列克隆到表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-MOMP.将重组质粒转化入E coli BL21进行表达,表达产物使用镍离子亲和层析柱进行纯化得到目的蛋白rMOMP.目的蛋白经Western-blot检测,证明其具有免疫学活性.
    근거GenBank중의원체주요외막단백(MOMP)전기인서렬설계특이성인물,이림상분리적의원체병원중제취적의원체전기인조위모판,이용특이성인물PCR확증득도MOMP전기인서렬.통과BLAST비대,결과현시기여이제교적저유산의원체CG1주적MOMP서렬(EU531729)유1개감기불동.근거대측서결과진행신호태서렬예측급내절매위점분석,선용BamH Ⅰ화Sal Ⅰ쌍매절장목적단백서렬극륭도표체재체pET-28a상,득도중조질립pET-28a-MOMP.장중조질립전화입E coli BL21진행표체,표체산물사용얼리자친화층석주진행순화득도목적단백rMOMP.목적단백경Western-blot검측,증명기구유면역학활성.
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