江苏大学学报(医学版)
江囌大學學報(醫學版)
강소대학학보(의학판)
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2013年
2期
93-98
,共6页
詹莉芳%张晓磊%翁晓琴%张海方%徐顺高%黄新祥
詹莉芳%張曉磊%翁曉琴%張海方%徐順高%黃新祥
첨리방%장효뢰%옹효금%장해방%서순고%황신상
伤寒沙门菌%OxyR%氧应激%生长曲线%实时荧光定量PCR
傷寒沙門菌%OxyR%氧應激%生長麯線%實時熒光定量PCR
상한사문균%OxyR%양응격%생장곡선%실시형광정량PCR
目的:研究OxyR蛋白对伤寒沙门菌(Salmonella enterica serovar Typhi,S.Typhi)在应激条件下生存能力的影响.方法:用λ-Red系统制备S.Typhi oxyR基因缺陷变异株;通过重组质粒pBAD/gⅢ将oxyR基因和pBAD/gⅢ空质粒分别导入oxyR基因缺陷变异株;构建oxyR缺陷回补株和oxyR缺陷回补空质粒株;制作生长曲线,观察野生株、oxyR缺陷株、oxyR缺陷回补株及oxyR缺陷回补空质粒株在不同应激条件下的生长状况;实时荧光定量PCR(qRTPCR)分析OxyR对S.Typhi氧化调节相关基因表达的影响.结果:成功制备S.Typhi oxyR基因缺陷变异株、oxyR基因缺陷回补株和空质粒对照株;生长能力分析结果表明,与野生株相比,oxyR缺陷株在氧应激时生长缓慢(P<0.05),oxyR缺陷回补株的生长能力得到恢复;qRT-PCR结果显示,在氧应激时OxyR蛋白可以抑制hemH基因的表达,活化uxuA基因的表达.结论:OxyR蛋白参与S.Typhi对氧应激的调节,为进一步研究S.Typhi的致病性奠定了基础.
目的:研究OxyR蛋白對傷寒沙門菌(Salmonella enterica serovar Typhi,S.Typhi)在應激條件下生存能力的影響.方法:用λ-Red繫統製備S.Typhi oxyR基因缺陷變異株;通過重組質粒pBAD/gⅢ將oxyR基因和pBAD/gⅢ空質粒分彆導入oxyR基因缺陷變異株;構建oxyR缺陷迴補株和oxyR缺陷迴補空質粒株;製作生長麯線,觀察野生株、oxyR缺陷株、oxyR缺陷迴補株及oxyR缺陷迴補空質粒株在不同應激條件下的生長狀況;實時熒光定量PCR(qRTPCR)分析OxyR對S.Typhi氧化調節相關基因錶達的影響.結果:成功製備S.Typhi oxyR基因缺陷變異株、oxyR基因缺陷迴補株和空質粒對照株;生長能力分析結果錶明,與野生株相比,oxyR缺陷株在氧應激時生長緩慢(P<0.05),oxyR缺陷迴補株的生長能力得到恢複;qRT-PCR結果顯示,在氧應激時OxyR蛋白可以抑製hemH基因的錶達,活化uxuA基因的錶達.結論:OxyR蛋白參與S.Typhi對氧應激的調節,為進一步研究S.Typhi的緻病性奠定瞭基礎.
목적:연구OxyR단백대상한사문균(Salmonella enterica serovar Typhi,S.Typhi)재응격조건하생존능력적영향.방법:용λ-Red계통제비S.Typhi oxyR기인결함변이주;통과중조질립pBAD/gⅢ장oxyR기인화pBAD/gⅢ공질립분별도입oxyR기인결함변이주;구건oxyR결함회보주화oxyR결함회보공질립주;제작생장곡선,관찰야생주、oxyR결함주、oxyR결함회보주급oxyR결함회보공질립주재불동응격조건하적생장상황;실시형광정량PCR(qRTPCR)분석OxyR대S.Typhi양화조절상관기인표체적영향.결과:성공제비S.Typhi oxyR기인결함변이주、oxyR기인결함회보주화공질립대조주;생장능력분석결과표명,여야생주상비,oxyR결함주재양응격시생장완만(P<0.05),oxyR결함회보주적생장능력득도회복;qRT-PCR결과현시,재양응격시OxyR단백가이억제hemH기인적표체,활화uxuA기인적표체.결론:OxyR단백삼여S.Typhi대양응격적조절,위진일보연구S.Typhi적치병성전정료기출.