畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2013年
4期
642-648
,共7页
郝桂娟%张凯%王旭荣%张景艳%王学智%孟嘉仁%杨志强%李建喜
郝桂娟%張凱%王旭榮%張景豔%王學智%孟嘉仁%楊誌彊%李建喜
학계연%장개%왕욱영%장경염%왕학지%맹가인%양지강%리건희
黄芪%益生菌FGM%发酵%α-半乳糖苷酶%aga2基因表达
黃芪%益生菌FGM%髮酵%α-半乳糖苷酶%aga2基因錶達
황기%익생균FGM%발효%α-반유당감매%aga2기인표체
通过对益生菌FGM所产α-半乳糖苷酶aga2基因在黄芪发酵不同阶段的表达水平分析,为α-半乳糖苷酶在黄芪发酵过程中的作用及其益生机制探究提供依据.绘制益生菌FGM在黄芪发酵过程中的生长及发酵液pH变化曲线,同源序列法克隆aga2基因,运用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术检测aga2基因在黄芪发酵不同阶段表达水平.结果表明,在发酵6h内FGM菌株处于对数生长期,大量产酸使pH由初始7.2迅速下降到5.3;12 h后细菌进入稳定期,pH下降到4.5;48 h至发酵结束pH稳定在4.0左右.成功克隆到一段648 bp的aga2基因片段(GenBank登录号KC202825),序列相似性最高达98％.发酵24 h内aga2基因表达逐渐上调并达到最高；36 h表达水平下降明显,仅是初始发酵水平的1.28倍,之后至60h又呈上升趋势.上述结果提示,益生菌FGM在黄芪发酵中可产生α-半乳糖苷酶以分解黄芪粉中的抗营养因子α-半乳糖苷类,其分解产物半乳糖通过Leloir途径中间产物UDP-半乳糖可能间接参与胞外多糖合成,为黄芪发酵产物中多糖得率增加起了一定作用.
通過對益生菌FGM所產α-半乳糖苷酶aga2基因在黃芪髮酵不同階段的錶達水平分析,為α-半乳糖苷酶在黃芪髮酵過程中的作用及其益生機製探究提供依據.繪製益生菌FGM在黃芪髮酵過程中的生長及髮酵液pH變化麯線,同源序列法剋隆aga2基因,運用SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR技術檢測aga2基因在黃芪髮酵不同階段錶達水平.結果錶明,在髮酵6h內FGM菌株處于對數生長期,大量產痠使pH由初始7.2迅速下降到5.3;12 h後細菌進入穩定期,pH下降到4.5;48 h至髮酵結束pH穩定在4.0左右.成功剋隆到一段648 bp的aga2基因片段(GenBank登錄號KC202825),序列相似性最高達98％.髮酵24 h內aga2基因錶達逐漸上調併達到最高；36 h錶達水平下降明顯,僅是初始髮酵水平的1.28倍,之後至60h又呈上升趨勢.上述結果提示,益生菌FGM在黃芪髮酵中可產生α-半乳糖苷酶以分解黃芪粉中的抗營養因子α-半乳糖苷類,其分解產物半乳糖通過Leloir途徑中間產物UDP-半乳糖可能間接參與胞外多糖閤成,為黃芪髮酵產物中多糖得率增加起瞭一定作用.
통과대익생균FGM소산α-반유당감매aga2기인재황기발효불동계단적표체수평분석,위α-반유당감매재황기발효과정중적작용급기익생궤제탐구제공의거.회제익생균FGM재황기발효과정중적생장급발효액pH변화곡선,동원서렬법극륭aga2기인,운용SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR기술검측aga2기인재황기발효불동계단표체수평.결과표명,재발효6h내FGM균주처우대수생장기,대양산산사pH유초시7.2신속하강도5.3;12 h후세균진입은정기,pH하강도4.5;48 h지발효결속pH은정재4.0좌우.성공극륭도일단648 bp적aga2기인편단(GenBank등록호KC202825),서렬상사성최고체98％.발효24 h내aga2기인표체축점상조병체도최고；36 h표체수평하강명현,부시초시발효수평적1.28배,지후지60h우정상승추세.상술결과제시,익생균FGM재황기발효중가산생α-반유당감매이분해황기분중적항영양인자α-반유당감류,기분해산물반유당통과Leloir도경중간산물UDP-반유당가능간접삼여포외다당합성,위황기발효산물중다당득솔증가기료일정작용.
