温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2013年
5期
304-306,310
,共4页
CD13%单抗%靶向治疗%质粒
CD13%單抗%靶嚮治療%質粒
CD13%단항%파향치료%질립
CD13%antibody%targeted therapy%plasmid
目的:探究通过脂质体转染技术介导重组质粒pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP转染293细胞的方法.方法:采用Lipofectamine 2000方法将包含目的基因pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP的质粒转染293细胞.在转染24 h后于荧光显微镜下观察红色荧光出现情况.收集并浓缩稳定转染后293细胞的上清液,提取细胞膜蛋白和胞浆蛋白,采用Western b1ot方式判断转染细胞是否表达目的蛋白.结果:①荧光显微镜下可观察到红色荧光蛋白(RFP)发出红色荧光.②Western b1ot鉴定结果:提取稳定转染的293细胞胞浆蛋白Western b1ot鉴定可见到大小为62 kD左右的条带.浓缩的上清蛋白与提取的胞膜蛋白Western b1ot鉴定未见到目的蛋白表达.结论:应用脂质体转染技术,成功介导目的基因pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP转染到293细胞中,为进一步研究重组CD13单链抗体对血液肿瘤的靶向杀伤作用打下了实验基础.
目的:探究通過脂質體轉染技術介導重組質粒pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP轉染293細胞的方法.方法:採用Lipofectamine 2000方法將包含目的基因pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP的質粒轉染293細胞.在轉染24 h後于熒光顯微鏡下觀察紅色熒光齣現情況.收集併濃縮穩定轉染後293細胞的上清液,提取細胞膜蛋白和胞漿蛋白,採用Western b1ot方式判斷轉染細胞是否錶達目的蛋白.結果:①熒光顯微鏡下可觀察到紅色熒光蛋白(RFP)髮齣紅色熒光.②Western b1ot鑒定結果:提取穩定轉染的293細胞胞漿蛋白Western b1ot鑒定可見到大小為62 kD左右的條帶.濃縮的上清蛋白與提取的胞膜蛋白Western b1ot鑒定未見到目的蛋白錶達.結論:應用脂質體轉染技術,成功介導目的基因pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP轉染到293細胞中,為進一步研究重組CD13單鏈抗體對血液腫瘤的靶嚮殺傷作用打下瞭實驗基礎.
목적:탐구통과지질체전염기술개도중조질립pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP전염293세포적방법.방법:채용Lipofectamine 2000방법장포함목적기인pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP적질립전염293세포.재전염24 h후우형광현미경하관찰홍색형광출현정황.수집병농축은정전염후293세포적상청액,제취세포막단백화포장단백,채용Western b1ot방식판단전염세포시부표체목적단백.결과:①형광현미경하가관찰도홍색형광단백(RFP)발출홍색형광.②Western b1ot감정결과:제취은정전염적293세포포장단백Western b1ot감정가견도대소위62 kD좌우적조대.농축적상청단백여제취적포막단백Western b1ot감정미견도목적단백표체.결론:응용지질체전염기술,성공개도목적기인pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP전염도293세포중,위진일보연구중조CD13단련항체대혈액종류적파향살상작용타하료실험기출.
